X染色质标本制备及观察.pptVIP

实验  X染色质标本制备与观察 [目的要求] （1）掌握X染色质标本制备方法及其原理。 （2）掌握X染色质的形态特征及其临床意义。 [实验原理] 一个个体不论其细胞中有几条X染色体，均只有一条具有转录活性，其余的X染色体均失活形成异固缩的X染色质。正常女性间期细胞核中X染色质阳性率一般约为10％一30％，有的可高达50％以上。其出现率的高低与个体不同生理状态、染色方法、染色技术以及X染色体在细胞核中的位置不同有关。在男性间期细胞核中则平均低于1％。一般检查X染色质确定性别时，观察200个细胞，X染色质出现5％以上者为女性。现在，X染色质检查已广泛应用于临床，作为性别测定和性染色体数目异常的一种辅助诊断方法。 [实验用品] (1)器材：显微镜、载玻片、牙签。 (2)试剂 ：0.2％甲苯胺蓝染液 、5mol/L HCl溶液 、95％乙醇、pH 6.0 PBS (3)材料：人口腔黏膜上皮细胞。 [方法与步骤] (1)取材制片：先让受检者用水漱口数次，然后用牙签钝头部刮取口腔下唇内侧面，弃去第一次刮到的细胞，在同一部位连刮几次，将刮取物均匀涂在干净的载玻片上晾干。 (2)固定：放入酒精缸中用95%乙醇固定15分钟. F (3)水解：玻片标本置于5mol/L HCl中，室温水解20 m