good猪传染性胃肠炎病毒反向遗传研究进展.pdf

畜牧与兽医2008年第40卷第4期 猪传染性胃肠炎病毒反向遗传研究进展 房红莹，罗满林‘ (华南农业大学兽医学院，广东广州510642) 遗传研究进展作一综述。TGEV全长基因组反向遗传系统的成功建立，极大推动了TGEV的复制机制、基因功能及作为疫苗开发的表达载体的 研究。 关键词：猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)；反向遗传；复制机制；表达载体 中图分类号：$852．65 文献标识码：A 文章编号2008)04-0087—05 猪传染性胃肠炎病毒(Transmissiblegastroenteri．为基因间序列(IS))。CS的37端、5’端侧翼序列分 tisvirusofswine，TGEV)是冠状病毒科冠状病毒属别称为3’TRS、57．TRS【2-5]。 1．2 成员，能引起猪传染性胃肠炎(TGE)，TGE是一种 TGEV的转录及调控 急性、高度接触性传染病，以呕吐、严重腹泻、脱水 为特征，不同年龄和不同品种的猪对本病都易感，给 同时也是合成互补(负链)RNA的模板，负链RNA 养猪业造成了较大的损失，目前TGE在世界许多国 又反过来复制子代RNA。因此，负链RNA是合成 家如中国、美国、日本、英国等许多国家流行…。 mRNA及子代病毒基因组的模板。 本文将从TGEV的分子生物学特性、TGEV的反冠状病毒的mRNA最大的是基因组RNA，它也 向遗传系统的建立及其在TGEV研究中的应用等几个 角度对国外TGEV反向遗传研究现状作一综述。 些RNA分子在37末端区具有嵌套式结构，由3’．末端 向5’·末端延伸形成不同长度的mRNA，除最小的 1 TGEV的分子生物学特性 1．1 TGEV基因组的结构 般来说，只有每个mRNA的5’端被翻译，所以功能 TGEV基因组为单股正链RNA，全长28．5kb， 上是单顺反子旧。71。 其5’端具有帽子结构，并与一短引导序列(约60一 负股RNA也以亚基因组形式存在，均含与引导 90 序列互补的序列，在负股RNA合成中也采取不连续 nt)相连，37端有一个280nt的非翻译区，紧接着 是poly(A)尾，基因组与核蛋白相结合，不分节 段，具有感染性。TGEV的整个基因组的结构顺序为模板的3’端转录的引导RNA，能从模板上解离下来 57la一1b-S一3a-3b—E—M—N-7 并仍能与聚合酶结合，引导序列一聚合酶复合体在2 3’。 个ORFs之间的间隔区与TRSs结合并识别，作为引 全基因组57端近2／3的RNA构成ORFla和 物转录RNAL8卅J。 ORFlb，编码复制酶(rep)。位于37端约8．3kb的 核苷酸已确定由6个基因组成，其中由ORF3a和 2 TGEV反向遗传研究 ORF3b构成的基因3及ORF7编码病毒的不同非结构 2．1 TGEV反向遗传系统建立 蛋白。ORF2、ORF4、ORF5和ORF6分别编码病毒 由于冠状病毒基因组RNA在所有已知RNA病毒 的纤突(S)蛋白、小膜(E)蛋白、膜内在(M) 中是最大的，同时cDNA克隆在宿主细胞不稳定等因 蛋白和核衣壳(N)蛋白。 素一直制约着冠状病毒全长基因组反向遗传系统的建 TGEV每个基因的5’端序列代表转录亚基因