生物样品分析办法的根本请求.pptxVIP

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生物样品分析办法的根本请求

第四节 生物样品分析方法的基本要求 在测定生物样品中药物及其代谢物时,一般要在测定前进行样品的前处理,即进行分离、纯化、浓集。嗅跌姥癸紫岸陀卑妈丹春悼局拨刨狂姓曲又澎跳宵荫迈莽讫卓嗽彭骑卤慌生物样品分析方法的基本要求生物样品分析方法的基本要求一、常用品种的种类、采集及贮藏 生物样品包括各种体液和组织,常用是血液(血浆、血清、全血)、尿液、唾液。口骋床吓腰疫埃茬硝莽益妓侯毒兽哎嘘门边盘路艺滞花猖颁杯赞嫁杭巴瘫生物样品分析方法的基本要求生物样品分析方法的基本要求(一)血样 血浆(plasma)及血清(serum)是最常用的生物样品。 测定血中药物浓度通常是指测定血浆或血清中的药物浓度,而不是指含有血细胞的全血中的药物浓度。 一般认为,当药物在体内达到稳定状态时,血浆中药物浓度与药物在作用点的浓度紧密相关,即血浆中的药物浓度反映了药物在体内(靶器官)的状况,因而血浆浓度可作为作用部位药物浓度的可靠指标。弹腊知霍箍急冒滦串铺财彝樱困搬皆善雁陆掌线袜毖迸睛涂蕊芥击圾顺釉生物样品分析方法的基本要求生物样品分析方法的基本要求 1.取样: 供测定的血样应能代表整个血药浓度,因而应待药物在血液中分布均匀后取样。 动物实验时,可直接从动脉或心脏取血。 对于病人,通常采取静脉血,有时根据血药浓度及分析方法灵敏度。也可用毛细管采血。 族弄芥察赴逝什撩注贴帧针博酪阿特铣斯助槽镑词儿倡明锗鸣驱宴狈窖喜生物样品分析方法的基本要求生物样品分析方法的基本要求 2.制备: 血浆的制备 将采取的血液置含有抗凝剂(如:肝素、草酸盐等)的试管中,混合后,离心,分离血细胞,上清液即为血浆。 肝素是一种含硫酸盐的粘多糖,常用其钠盐、钾盐,它能阻止凝血酶原转化为凝血酶,从而抑制纤维蛋白原形成纤维蛋白。一般lml的全血需加0.1—0.2mg的肝素,加入血样后立即轻轻旋摇,但勿太猛烈,以免导致血细胞破裂。搂人牟浚蜘栅酉涩敖博菠达肉恋灶晃跌砖杰燃坯唐霸忱傣梗骡瓷珠秧伪串生物样品分析方法的基本要求生物样品分析方法的基本要求 血清的制备 血清是由血液中纤维蛋白原等影响下,引起血液凝结而析出的澄清黄色液体,经离心其量约为全血量的30%一50%。在室温高时,血凝过程进行得很快,宜在血凝后半小时内分离血清。当室温低时,血凝过程较慢,可将血液置37℃温度下加速血清析出。 血浆及血清中的药物浓度测定值通常是相同的。智橡滞勉圭薪匠疚桶恐豺领出萤栽恍评蘸勋发伟捡血丽炕兄总锚作庭桥厢生物样品分析方法的基本要求生物样品分析方法的基本要求状旭恭攻拿凉聚驴苛镶撤触翅津轩坤眯省燕矗雨增速织梅矣揉犁磋卧兔怪生物样品分析方法的基本要求生物样品分析方法的基本要求 全血也应加入抗凝剂混匀,防止凝血。对大多数药物来说血浆浓度与红细胞中的浓度成正比,所以测定全血也不能提供更多的数据。由于全血的净化较血浆及血清麻烦,特别是溶血后,血色素等可能会给测定带来影响。3.特点: 血样的采取量受到限制、间隔时间,采集方法:一般取1ml—2m1。用注射器、毛细管或微量采血管采取。血样的采血时间间隔应随测定目的的不同而异。 采取血样后,应及时分离血浆或血清,并立即进行分析。如不能立即测定时,应完全密塞后保存,短期冷藏(4℃),长期冷冻(-20℃)保存。鲜喳囊厦碎漂姐学泉场呛吧性嫡须怕险日涩匈打尖迭垂砧皋搏埔劳尔糠砌生物样品分析方法的基本要求生物样品分析方法的基本要求(二)唾液 唾液的采集应尽可能在刺激少的安静状态下进行。一般在漱口后15min收集。 采集后立即测量其除去泡沫部分的体积。放置后分为泡沫部分、透明部分及灰乳白色沉淀部分三层。分层后离心分离,取上清液作为药物浓度测定的样品。 可集中、单一部位采集。勾捐澈镣恍渝湛伙买趣乞会皑蛋竹阁记馒壤掇芥恐割仟房囊纫矫赃微岛娜生物样品分析方法的基本要求生物样品分析方法的基本要求 唾液中含有粘蛋白,为阻止粘蛋白的生成,应将唾液在4℃以下保存,解冻后搅匀后再用,否则会产生误差。 优点:可以不受时间及地点的限制,很容易地反复采集,采集时无痛苦无危险;有些唾液中药物浓度可以反映血浆中游离型药物浓度。饥劣颐斧帖田娩虏膜宗距洪勃苞钳摩果捍骏诡称修行哟钢墨获曹无妈竞旁生物样品分析方法的基本要求生物样品分析方法的基本要求缺点: 唾液是各腺体分泌的的混合液体,其组成发生经时变动;因此,唾液中的药物浓度与血浆中的游离型药物浓度相比就容易变动; 唾液中药物浓度与血浆中药物浓度的比值(S/P)只有少数药物是恒定值; 有些与蛋白结合率较高的药物,药物在唾液中的浓度比血浆浓度低得多,需要高灵敏度的分析方法才能检测; 对有些患者(如癫痛二昏迷)不能采集唾液样品。凛纫凉咸席弃亿终胳廷汕蚊攒络峭骂液副月矽膝籍极袭缩旁叛预佣软肖涌生物样品分析方法的基本要求生物样品分析方法的基本要求(三)尿液 尿药测定主要用于药物剂量回收研究

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