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鹅掌揪叶片发育相关蛋白的双向电泳分析
摘 要
本文对ISO-DALT进行了优化，建立了适合木本植物叶片蛋白质分析的双向电泳技术
体系，实验结果如下：
(1)三氯乙酸，丙酮制干粉提取法是鹅掌楸叶片蛋白样品处理的较为优化的方法。
(2)确立了一套较为优化的等电聚焦程序，在相对密闭的条件下，可以减少电泳系统对
c02的吸收，同时采用最佳的等电聚焦时间，使阴极漂移的现象大大减弱。
(3)平衡的时间以25—30分钟为佳，测量pH梯度时标样法要优于浸泡法。
从本文的电泳图谱可以发现，IsO．DAIJ技术体系也能够得到比较稳定的电泳图谱，
完全可以达到实验的要求。
利用优化的IsO—DALT技术，对鹅掌楸叶片生长发育过程进行了双向电泳分析，发现：
部分蛋白质在叶片不同发育阶段中都稳定表达，有一些蛋白质具有发育阶段表达特异性。
(3)5月到6月的成熟期叶片蛋白质变化比较明显，蛋白斑点(53
kD，p15．95)的丰度
明显下调，与黄化期蛋白质变化相比较后可以发现，斑点(18．6
l①，p14．73)、(20．1D，
kD，p15．95)的丰度下调密切相关，这些蛋白在蛋白质周转中可能起着重要的作用。
(4)蛋白斑点(24．5
m，p16．30)为叶片黄化期特异斑点，与该发育阶段密切相关。
关键词：鹅掌楸发育双向电泳等电聚焦
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