巴西橡胶树鲨烯合酶基因的克隆与序列分析.pdfVIP

广 西 植 物 Guihaia Mar．2014，34(2)：235—241 http：／／journa1．gxzw．gxib．ca DOI：10．3969／J．issn．1000-3142．2014．02．019 张志平 ，仇键 ，杨文风，等．巴西橡胶树鲨烯合酶基因的克隆与序列分析EJ]．广西植物，2014，34(2)：235—241 ZhangZP，QiuJ，YangWF，eta1．Cloningandbioinformaticsanalysisofsqualenesynthasegene(SQS)fromHeveabrasiliensis[J]．Guihaia，2014 34(2)：235—24l 巴西橡胶树鲨烯合酶基因的克隆与序列分析 张志平 ，仇 键 ，杨文凤。，魏 芳 ，校现周 (1．海南大学 园艺园林学院，海南 儋州 571737；2．中国热带农业科学院 橡胶研究所，海南 儋州 571737) 摘 要：鲨烯合酶(SQS)是植物甾醇和三萜化合物生物合成途径中的关键酶。以巴西橡胶树为试验材料，提取 胶乳总RNA，利用 RT-PCR以及 RACE的方法克隆橡胶树鲨烯合酶 cDNA编码区片段，并进行序列分析。结果 表明：橡胶树鲨烯合酶cDNA编码区为 1239bp，编码413个氨基酸，命名为 HbSQS。荧光定量分析表明鲨烯合 酶基因在不同组织里表达水平存在明显差异 ，且受乙烯调控 。 关键词：橡胶树 ；鲨烯合酶；序列分析 中图分类号 ：Q781 文献标识码：A 文章编号 2014)02—0235—07 Clonin~ anc1ID■1●O1n‘tn0m ati●csanal1VSl●S0tSqUal■ene synthasegene(sQs)fromHeveabrasiliensis ZHANG Zhi—Ping ，QiUJian ，YANGWen-Feng， W EIFang ，XIAO Xian-Zhou (1．CollegeofHorticultureandLandscapeArchitecture，HainanUniversity，Danzhou571737，China； 2．RubberResearchInstitute，ChineseAcademyofTropicalAgriculturalSciences，Danzhou571737，China) Abstract：Squalenesynthase(SQS)isakeyenzymeinplantterpenoidbiosyntheticpathway．ThetotalRNA were extractedfrom Heveabrasiliensisrelax，andthecDNA ofsqualenesynthasewasclonedusingRT-PCR andRACE strategy．TheresultsshowedthatthecDNA(namedasHbSQS)containeda1239bpopenreadingframeandencoded apredictedproteinof413aminoacids．SYBR GreenIRealTimeRT-PCRanalysisindicatedthattheHbSQSwas morehighlyexpressedinbarkthaninleaf．ThetranscriptionofHbSQS inlatexwasinducedbyethylene． Keywords：Heveabrasiliensis；squalenesynthase；sequenceanalysis 巴西橡胶树 (Heveabrasiliensis)作为天然橡胶 化两分子的法尼基焦磷酸缩合生成 甾醇、胆 固醇和 的主要来源 ，在世界经济发展 中一直 占有重要地位 ， 三萜等萜烯类化合物的第 1个前体一鲨烯 (Pandit 是一种非常重要 的热带经济及能源作物。核磁共振 eta1．，2000；李季伦等 ，1993)。正向调节刺