多肽突变体Cbf142抗青霉素耐药细菌的活性研究-中国药科大学.PDF

学 报 ４９６ ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　２０１７，４８（４）：４９６－５０２ 多肽突变体 Ｃｂｆ１４２抗青霉素耐药细菌的活性研究 汪梦筱，马菱蔓，刘含含，蒋美玲，窦　洁，周长林 （中国药科大学微生物学教研室，南京２１０００９） 摘　要　本研究主要探讨了新型多肽突变体Ｃｂｆ１４２对携带ＮＤＭ１基因重组菌（ＥｃｏｌｉＢＬ２１（ＤＥ３）ＮＤＭ１）的抗菌活性 及机制。实验采用肉汤倍比稀释活菌计数法测定多肽对ＥｃｏｌｉＢＬ２１（ＤＥ３）ＮＤＭ１重组菌的ＭＩＣ／ＭＢＣ和杀菌曲线，评价 多肽的体外抗菌活性；采用重组菌腹腔感染法建立小鼠败血症模型，评价多肽的体内抗菌活性；通过Ｚｅｔａ电位分析和流式 细胞术探讨Ｃｂｆ１４２抗耐药细菌感染的作用机制。结果表明，多肽 Ｃｂｆ１４２对携带ＮＤＭ１基因的耐药细菌具有良好的抗 菌活性（ＭＩＣ＝１６ ｇ／ｍＬ），能在２ｈ内快速杀灭细菌；同时，多肽能显著降低感染小鼠肝、脾、肺和肾脏等组织的细菌负载 μ 量，对细菌显示出强效清除能力，将小鼠存活率由１０％提高至７０％。这主要由于Ｃｂｆ１４２能与细菌细胞膜表面负电荷发生 静电结合，增加对膜的穿透能力。因此，Ｃｂｆ１４２有望成为治疗ＮＤＭ１耐药细菌诱发感染的潜在抗菌剂。 关键词　抗菌肽；Ｃｂｆ１４２；抗菌活性；ＮＤＭ１ 中图分类号　Ｒ９６　　文献标志码　Ａ　　文章编号　１０００－５０４８（２０１７）０４－０４９６－０８ ｄｏｉ：１０．１１６６５／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００－５０４８ 引用本文　汪梦筱，马菱蔓，刘含含，等多肽突变体Ｃｂｆ１４２抗青霉素耐药细菌的活性研究［Ｊ］．中国药科大学学报，２０１７，４８（４）：４９６－５０２ Ｃｉｔｅｔｈｉｓａｒｔｉｃｌｅａｓ：ＷＡＮＧＭｅｎｇｘｉａｏ，ＭＡＬｉｎｇｍａｎ，ＬＩＵＨａｎｈａｎ，ｅｔａｌＥｆｆｅｃｔｉｖｅａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＣｂｆ１４２ａｇａｉｎｓｔｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎｒｅｓｉｓｔａｎｔｂａｃ ｔｅｒｉａｉｎｖｉｔｒｏａｎｄｉｎｖｉｖｏ［Ｊ］．ＪＣｈｉｎａＰｈａｒｍＵｎｉｖ，２０１７，４８（４）：４９６－５０２ ＥｆｆｅｃｔｉｖｅａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＣｂｆ１４２ａｇａｉｎｓｔｐｅｎｉｃｉｌｌｉｎｒｅｓｉｓｔａｎｔｂａｃｔｅｒｉａ ｉｎｖｉｔｒｏａｎｄｉｎｖｉｖｏ  ＷＡＮＧＭｅｎｇｘｉａｏ牞ＭＡＬｉｎｇｍａｎ牞ＬＩＵＨａｎｈａｎ牞ＪＩＡＮＧＭｅｉｌｉｎｇ牞ＤＯＵＪｉｅ牞ＺＨＯＵＣｈａｎｇｌｉｎ ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ牞ＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ牞Ｎａｎｊｉｎｇ２１０００９牞Ｃｈｉｎａ Ａｂｓｔｒａｃｔ　ＴｈｅａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌａｃｔｉｖｉｔｙａｎｄｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｔｈｅａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌｐｅｐｔｉｄｅｍｕｔａｎｔＣｂｆ１４２ａｇａｉｎｓｔＮＤＭ１ ｃａｒｒｙｉｎｇｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔｂａｃｔｅｒｉａ牗ＥｃｏｌｉＢＬ２１牗ＤＥ３牘ＮＤＭ１牘ｗａｓｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄｉｎｔｈｉｓｓｔｕｄｙＴｈｅｍｉｎｉｍｕｍｉｎｈｉｂｉ ｔｏｒｙｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ牗ＭＩＣ牘牞ｍｉｎｉｍｕｍｂａｃｔｅｒｉｃｉｄａｌｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ牗ＭＢＣ牘ａｎｄｋｉｌｌｉｎｇｃｕｒｖｅｓ牗ＫＣｓ牘ｉｎｖｉｔｒｏｗｅｒｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙｔｈｅｂｒｏｔｈｍｉｃｒｏｄｉｌｕｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄＭｉｃｅｓｅｐｔｉｃｅｍｉａｍｏｄｅｌｗａｓｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｂｙｉｎｔｅｒａｐｅｒｉｔｏｔｏｎｅａｌｉｎｊｅｃ ｔｉｏｎｏｆＥｃｏｌｉＢＬ２１牗ＤＥ３牘ＮＤＭ１ｔｏｅｖａｌｕａｔｅｔｈｅａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｔｈｉｓｐｅｐｔｉｄｅｉｎｖｉｖｏＲｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔＣｂｆ１４２ｅｘｈｉｂｉｔｅｄａｐｏｔｅｎｔａｎｔｉｂａ