叶绿素合成关键酶基因表达的半定量RT-PCR分析Expression.PDF

基因组学与应用生物学，2015 年，第34卷，第3期，第593-598 页 GenomicsandAppliedBiology,2015,Vol.34,No.3,593-598 研究报告 ResearchReport 叶绿素合成关键酶基因表达的半定量RT-PCR分析 姚嘉龙 郭蓓 谢皓* 北京农学院植物科学技术学院/ 北京农业应用新技术北京市重点实验室,北京,102206 *通讯作者,xiehao126@126.com 摘 要 为了解叶绿素合成关键酶基因在大豆不同生育期的表达情况，本研究以拟南芥叶绿素合成关键 酶基因序列设计引物，大豆科丰 14和它的持绿突变体BN108 为试材，利用半定量RT-PCR 分析了9 种叶 绿素合成关键酶基因在开花期和成熟前期表达量的变化。结果表明， 、 、 、 、 基因 HEMA GSA HEME POR CHLG 在成熟前期表达量显著下降( 0.05)，尤其是 和 基因的表达量下降幅度较大，说明上述基因在 p HEMA GSA 叶绿素生物合成过程中起到主要调控作用；而突变体BN108 有别于科丰 14， 、 、 和 GSA HEME CHLM CAO 基因表达量在成熟前期不降反升，推测持绿突变体在成熟前期叶绿素能够维持较大的合成量，是植物持绿 现象的重要原因之一。 关键词 大豆, 叶绿素,关键酶基因,表达,半定量PT-PCR Expression Analysis of Key Enzyme Gene Involved in Chlorophyll BiosynthesisbySemi-quantitativeRT-PCR YaoJialong GuoBei XieHao* CollegeofPlantScienceandTechnology,BeijingUniversityofAgriculture/KeyLaboratoryofNewTechnologyinAgriculturalApplication,Bei- jing,102206 *Correspondingauthor,xiehao126@126.com DOI:10.13417/j.gab.034.000593 Abstract Theobjectiveofthisstudywastodissecttheexpressionvariationofkeyenzymegeneinvolvedin chlorophyllbiosynthesisatdifferentdevelopmentstagesofsoybean.Primersweredesignedaccordingtothekey enzymegenesequenceofchlorophyllbiosynthesisinArabidopsis,semi-quantitativeRT-PCRwasemployedto analyze expression variations ofkeyenzyme gene in chlorophyll biosynthesis at flowering and early maturity stagesforKF14anditsstay-greenmutantBN108insoybean.Theresultsshowedthatgeneexpressionlevelsof , , , and in KF14,especiallyfor and hadsignificantdecline ( 0.05) HEMA GSA HEME POR CHLG HEMA GSA p duringearlymaturitystagethanduringfloweringstage.Itmeantabovechlorophyllbiosynthesisgenesthatmight playama