10 生物和技术制药.ppt

基因工程制药 抗体制药 动物细胞制药 植物细胞制药 酶工程制药 现代生物技术改造传统制药工业 生物技术制药概念： 采用现代生物技术,借助某些微生物、植物、动物生产医药品，叫生物技术制药。 现代生物技术的基础学科和分支 生物制药的特点 专一性 无残留性 有预防性 少依赖性 一、药物的来源 从动植物中分离 猪苓多糖提取为例 二、生物技术——DNA诊断 指对患者某一特定基因或其转录产物进行检测，获取突变基因，从而对疾病进行诊断。称基因诊断、DNA探针技术。 类型：酶谱分析法、探针杂交分析法、PCR等方法。 应用：遗传病（染色体病、单基因遗传病、多基因遗传病、线粒体遗传病、体细胞遗传病）；癌症监测；传染性疾病诊断。 二、生物技术——干细胞技术 干细胞：指具有自我更新、无限增殖扩容及多向分化潜能的细胞。 按其来源分：胚胎干细胞、组织干细胞 应用：治疗性克隆：利用病人体细胞克隆为干细胞，其DNA编码和基因表型均与病人完全一致，避免免疫排斥反应。 三、生物技术药物的分类 生物技术药物可粗分为三大类： 1、重组蛋白质药物 2、治疗性抗体药物 3、核酸药物 1、重组蛋白质药物 重组DNA技术生产的蛋白。 1、重组蛋白质药物 目前经批准的重组蛋白类药物，按照结构可分为三类： （1）与人完全相同的多肽和蛋白质 （2）与人密切相关但不同的多肽和蛋白质，在氨基酸序列上或翻译后修饰上的差异 （3）与人相关较远或无关的多肽和蛋白质，如具有调节活性，但和已知的人多肽和蛋白质没有同源性的多肽和蛋白质、双功能的融合蛋白、经蛋白质工程改造和模拟的活性蛋白。 2、治疗性抗体药物 B淋巴细胞—抗原表位 单克隆抗体—鼠的脾细胞与鼠的骨髓瘤细胞融合。人源或人源化单克隆抗体可以解决鼠源性单克隆抗体的免疫原性。即利用抗体工程对抗体进行改进从而得到具有一定用途，而对人体产生剧烈反应的抗体。 采用PCR技术、噬菌体表面展示技术和大肠杆菌表达技术构建人抗体库，从中筛选人源性抗体。 3、核酸药物 寡核苷酸药物是具有专一顺序的寡核苷酸，用于阻断有害基因的表达。其特点是有高的特异性，其降解产物对人体无害。 核酸药物可分为反义核酸、核酶、脱氧核酶、抗基因寡核苷酸和裸DNA疫苗与基因药物。 3、核酸药物 反义核酸为与mRNA的一段顺序互补的序列，能阻断mRNA的翻译；它通过与mRNA配对形成杂交双链，经RNase H水解DNA/RNA杂交双链中的RNA链，从而阻断基因的表达。 核酶是一种具有催化作用的RNA，通过碱基配对与靶RNA相互识别、结合并水解催化靶RNA从而阻断基因的表达。 3、核酸药物 脱氧核酶是具有酶活性的DNA分子，它的酶活性可特异切割RNA，从而抑制基因的表达。 抗基因寡核苷酸是将它嵌入双链DNA的大沟中形成DNA三股螺旋，抑制DNA结合蛋白（如转录活化因子）和RNA聚合酶的结合，从而抑制基因的转录。 核酸药物中另一类为裸DNA基因疫苗与基因药物，它们是将具有预防和治疗疾病的功能基因与真核表达载体重组，将此重组DNA导入人体细胞，使其表达活性的多肽或蛋白质，产生免疫或治疗作用。 三、生物技术药物的分类 生物技术药物可细分为四大类： 酶类、激素和多肽类、疫苗、单抗。 疫苗——基因工程疫苗、核酸疫苗 基因工程疫苗：基因重组疫苗、基因重组亚单位疫苗、重组牛痘病毒多价活疫苗、基因修饰减毒灭活疫苗。——第二代疫苗 核酸疫苗：DNA疫苗和RNA疫苗。——第三代疫苗 单抗：利用细胞融合技术获得。 生物技术药物与其它药物之间的区别，主要由生物技术药物的以下特点所决定的： （1）生物技术药物的生产复杂，技术要求高，要有严格的监控措施。 （2）生物技术药物稳定性易受外界环境条件影响。 （3）生物技术药物存在着种属特异性。 （4）生物技术药物副作用较小，毒性较低，安全性高。 （5）生物技术药物，很多在体内的半衰期短，迅速降解，并在体内降解的部位广泛，药效反应快。 生物技术来源药物的新药评价按其特点可分为5个阶段，即：（1）实验室研制与验证；（2）中试及质量验证；（3）临床前药效、药代、药理与毒理验证；（4）临床试验；（5）生产 当完成临床前试验时向国家药品监督管理局注册司提出申请临床实验的资料，当临床Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期结束后，一、二类新药提出申请试生产的资料。临床Ⅳ期结束后，一、二类新药再提出申请转为正式生产的报告。 发现和筛选生物技术新药: （1）从自然界、人或动物或植物中分离提取具有药物作用的生物活性蛋白，以基因工程技术钓取或合成其对应的基因片段，构建能表达制造某种药物的工程菌或细胞株。 （2）从基因工程构建的基因组DNA文库中，筛选表达某生物功能的活性蛋白的克隆，制备该活性蛋白，通过理化生物活性的分析和进一步筛选来获得生物技术新药。 （3）应用PCR技术、噬菌体表达技术构建噬菌体文库、