DNA提取及P与CR.pptVIP

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  • 2017-11-10 发布于浙江
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DNA提取及P与CR

* 实验操作:(每一位同学独立操作) 说明:可调加样器的使用。 10人一组,组内每位同学依次加完第一种试剂后,换tip头,再依次加第二种试剂。其余试剂类推。 Exp3.2 兔抗凝全血基因组DNA提取 EDTA为金属离子络合物,能抑制细胞内的DNA酶活性,EDTA.2Na抗凝能够保证提取过程中DNA分子的完整性。 Triton X-100(聚乙二醇辛基苯基醚)是一种非离子表面活性剂,可同时破红、白细胞膜,直接得到细胞核。(细胞裂解液:10mM pH7.5 Tris-HCl 0.32M 蔗糖;5mM MgCl2; 1%Triton-100) 生物检材中的金属离子在高温和低离子强度溶液条件下能催化DNA降解。 Chelex-100是一种由聚乙烯二烯苯组成的螯合剂,对多价金属离子有螯合作用,所以Chelex-100能有效地防止煮沸过程中模板DNA的降解。 [实验步骤]: 一、细胞裂解 1. EDTA抗凝血 100ul (1.5ml EP管) + 900ul 1×细胞裂解液, 用力倒转混匀1分钟,室温10分钟; 10000rpm 5分钟

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