基于结构信息的酶解制备ACEIP.pdfVIP

华南理工大学学报(自然科学版) Jo啪a1ofSoumChina Vol_34No．12 第34卷第12期 Univers姆ofTecllllology Science December2006 2006年12月 (NatI】fal Edition) 基于结构信息的酶解制备ACEIP术 朱志伟1 涂小珂2 曾庆孝1 阮 征1 张德聪3 3．华南理工大学化学科学学院，广东广州510640) 摘要：在结构信息分析的基础上，选择具有特定作用位点的酶，进行酶解制备血管紧张 素转化酶抑制肽(ACEIP)的研究，对以结构信息为基础的定向控制酶解制备模式进行了 初步探讨．文中首先通过全略微分重叠计算，对所选择的11种抑制剂的结构信息进行分 (ACE)的抑制效果较好；在此基础上，选择具有特定作用位点的酶，以罗非鱼肉为对象进 行酶解制备AcEIP的研究，并对酶解产物进行分离和分析，发现其中含有Thr．cys、Asp一 唧和Glu—Met，所得结果与理论分析结果相符，初步说明了以结构信息为基础的定向控 制酶解制备模式的可行性． 关键词：血管紧张素转化酶抑制肽；酶解；结构信息；全略微分重叠计算 中图分类号：rrs201．2 文献标识码：A 食物来源的蛋白质在一定条件下经蛋白酶水解 1计算和实验方法 后可以获得生物活性肽，例如血管紧张素转化酶抑 1．1 制肽(AcEIP)u引．目前AcEIP制备多采用“酶解筛计算方法 选”的制备模式，制备的目标不明确．AcEIP的高效 考虑到与多肽结构的相似性，选取11个含羧基 制备需要采用定向控制酶解的方法，其中涉及到作 官能团的血管紧张素转化酶抑制剂(AcEI)分子作 用底物，酶的选取以及酶解工艺的控制。Ramanathan 为研究对象，如表1所示．计算采用全略微分重叠近 等o¨制备得到Lisinopril(赖诺普利)与AcE作用的 似法(cNDO)对11个分子的构型进行优化，以得到 结晶体，指出“sinopril中部分基团对AcE活性区 能量最低时的稳定构型，并对其优势构型进行量化 域中的zn、s1、Sl7和S2’部位存在离子键和分子问 表1理论计算中选用的AcEI 力的作用．若能对高效AcE抑制物的结构信息进行 7rable1 ACEIselectedfortheoreticalcalculation 分析，对AcE抑制物应具备的某些特征进行总结， 可以提高ACEIP的目的性．本实验主要是通过理论 计算分析AcE抑制物的结构信息特点，以结构信息 为基础进行酶的选择及制备AcEIP，对AcEIP的控 制酶解制备新模式进行了初步的探索． 收稿日期：2005—10—20 +基金项目：广东省自然科学基金博士启动基金资助项目 ；华南理工大学自然科学基金青年基金资助项 目(E5040970) 作者简介：朱志伟(1974一)，男，博士，讲师，主要从事食品 科学与工程研究．E．mail：zhwzhu@scut．edu．cn 42 华南理工大学学报(自然科学版) 第34卷 1．2．5酶解工艺 计算‘8引，得到抑制剂分子HOMO和LUMo轨道的 主