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第五章噬菌体与杂菌污染
第五章、噬菌体与杂菌的污染与防治 第一节、Glu发酵中噬菌体(phage)的污染与防治 一、什么是噬菌体 病毒的一种 特征: 传播途径: 二、谷氨酸发酵中的噬菌体污染 1.侵染的异常现象 “二高三低” (1)二级种子污染噬菌体 (2)发酵前期污染噬菌体 (3)发酵后期污染噬菌体 2.噬菌体严重污染的早期预报 (1)空气与二级种子液的定期检查 噬菌体检查方法: ①双层平板法 ②划线法 ③液体培养法 (2)等电及精制异常现象的预报 三、防治噬菌体对谷氨酸发酵的污染 1.合理使用抗性菌株 2.利用药物防治噬菌体 3.采取以环境净化为中心的综合防治措施 (1)定期检查噬菌体 (2)严禁活菌体任意排放 (3)杀灭环境中的噬菌体 (4)杀灭压缩空气中的噬菌体 (5)避免噬菌体侵袭菌种 (6)避免噬菌体侵入设备 4.谷氨酸发酵污染噬菌体后的挽救 (1)并罐法 (2)菌种轮换或使用抗性菌株 (3)放罐重消法 (4)罐内灭噬菌体法 第二节、杂菌的污染与防治 一、杂菌隐患的检查和处理 1.染菌检查 (1) 检查净化空气 (2)检查培养基和培养物 (3)检查发酵罐 (4)检查管道的污染隐患 (5)检查无法直接观察的设备部件染菌隐患 显微镜检法、平板划线法、肉汤培养检查法 2.染菌的分析和处理 2.1染菌的分析 (1)以时间 早期: 中后期: (2)以杂菌类型 芽孢杆菌 球菌等不耐热菌 霉菌 (3)整厂染菌 (4)个别染菌 2.2染菌的处理 (1)种子培养期染菌 (2)发酵前期严重染菌 (3)发酵中、中期染菌 (4)染菌后对设备的处理 二、染菌的预防措施 1.空气的净化 (1)减少滤前空气的尘粒 (2)减少滤前空气的油水含量 (3)保证压缩空气的温度 (4)妥善装填过滤介质 (5)选用高效滤材 (6)保持一定的气流速度 2.培养基和设备的灭菌 (1)合理调配培养基 (2)保证灭菌温度和时间 (3)保证设备无积污和渗漏 (4)保证流动蒸汽质量 (5)减少泡沫 (6)正确进行空气保压 3.发酵设备的安装 (1)防止轴封渗漏 (2)合理安装罐内设备 (3)合理安装管路 (4)阀门的连接 (5)管路的布置 (6)管路的试漏 (7)管路的吹洗 法兰的“死角” a—垫圈内径过小;b—垫圈内径过大;c—法兰不平造成的泄漏与“死角” 4.培养物的移接 (1)严格进行斜面和摇瓶菌种的无菌操作 (2)严格进行种子罐的无菌操作 * * 1.Glu发酵中噬菌体(phage)的污染与防治 2.Glu发酵中杂菌的污染与防治 谷氨酸发酵时正常和异常的溶氧曲线 不锈钢衬里破裂造成“死角” 发酵罐罐底脓疱状积垢 罐底的加强板 灭菌时蒸汽不易通达的“死角”及其消除方法 压力表安装不合理形成“死角” 1,6—发酵罐;2—缓冲管;3,4—压力表;5—旋塞 * * *
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