多酶共固定化反应体系的研究进展.PDF

中国生物工程杂志　ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１５，３５（１）：８２８７ ＤＯＩ：１０．１３５２３／ｊ．ｃｂ 多酶共固定化反应体系的研究进展 汤玉兰　陈缵光　成志毅 （中山大学药学院　广州　５１０００６） 摘要　近年来，生物催化为化学、生物学和生物工程学等领域提供了一种绿色研究工具，其中多 酶体系在这些领域中的应用越来越受到关注，其克服了以往单个酶不能满足催化需求的局限性， 同时多酶共固定化在级联反应过程中，可增加酶周围的反应物浓度，并将不同酶的催化特性结合 起来，能排除干扰因素，从而提高酶的整体催化效率。对多酶共固定化反应体系的研究进展进行 了综述，包括多酶反应体系的类别、共固定化技术的特点以及相关应用，并对共固定化多酶反应 体系进行了展望。 关键词　共固定化　生物催化　多酶 中图分类号　Ｑ８１４ 　　生物催化由于其高效的催化机制、独特的底物选 化技术的研究正在迅速堀起，并在生物、医药、环境等 择性以及反应的可控性，使其在化学、生物工程学及药 领域取得了许多新成果。本文对多酶反应体系的类别 ［１］ 进行了归纳，重点讨论了多酶共固定化技术及其特点， 品生产等领域具有广阔的应用前景 。在自然界中， 存在许多级联生物催化反应，这些反应通常需要不同 并简单介绍其相关应用。 类型的酶高度有序地 自组装成 的多酶复合体 １　多酶反应体系的分类 （ｍｕｌｔｉｅｎｚｙｍｅｃｏｍｐｌｅｘｅｓ，ＭＥＣｓ）参与，其通过提高中间 产物在不同酶之间的转运浓度从而高效地完成催化反 　　在自然界中，我们可以在细胞内不同代谢途径中 ［２３］ 发现大量的多酶级联反应，这些反应通常需要两种或 应 。 　　受自然界中ＭＥＣｓ的启发，越来越多的研究者运用 两种以上的酶参与完成，由于这些反应体系具备独特 单酶固定技术成功地在各种载体上固定多种酶。体外 的优点，如反应条件温和、催化效率高、专属性强等倍 ［７］ ［８］ 多酶共固定化体系可明显提高酶的稳定性，缩小酶与 受关注 ，其中Ｒｉｃｃａ等 对体外多酶级联反应体系进 反应物之间的距离，增大酶周围的反应物浓度，并将不 行研究，并将多酶生物催化反应体系分为四类（如图 同酶的催化特性结合起来，从而提高酶催化效率［４］；此 １）：（１）线性级联反应，即单个底物经酶催化为一个或 外，多酶体系也适用于原位辅酶再生反应过程，极大的 多个中间物后转化为单个最终产物（ａ）；（２）正交级联 ［５］ 反应，即酶将底物转化为产物后在辅助底物存在时参与 降低了大规模生物催化反应的成本 。然而，基于单 酶２反应以便辅因子或辅助底物再生，或者移除生成的 酶固定化技术的多酶共固定化技术仍存在许多挑战： 副产物，使反应向正方向进行（ｂ）；（３）并行级联反应，即 首先，多酶共固定化技术需要考虑单个酶的结构和功 两种底物经两种不同生物催化反应体系在辅酶或辅助底 能，优化出最佳条件保持每个酶的活性及稳定性；其 物的协同下转化为两种产物（ｃ）；（４）循环级联反应，即 次，载体应具有良好的兼容性从而不影响酶活性，并且