二维平面细胞微图案化技术和其生物学应用.pdf

第37卷 分析化学(FENXIHUAXUE)特约来稿 第7期 of 2009年7月 ChineseJournalAnalytical 943～949 Chemistry 二维平面细胞微图案化技术及其生物学应用 刘文文 陈振玲 蒋兴宇。 (国家纳米科学中心，北京100190) 摘要可以控制细胞粘附形状、大小的方法统称为细胞图案化技术。这些方法结合微纳米制备、表面化学、 电化学和光化学等手段可以动态控制细胞的粘附、迁移、分化及其相互作用，为细胞生物学研究提供了一个新 平台。本文介绍了二维平面细胞图案化的各种方法，并对其优缺点进行了总结，评述了细胞图案化技术在细 胞生物学基础研究、组织工程以及基于细胞的生物传感器领域的应用。 关键词细胞图案化，组织工程，细胞传感器，自组装单层膜，软刻蚀，评述 1 引 言 20世纪70年代，用于生物分子和细胞的图案化技术已开始出现H]。细胞图案化技术主要分为两 类：一类是通过表面修饰形成细胞粘附生长的图案化区域，使细胞选择性地粘附生长形成图案；另一类 是通过可移除的物理障碍将细胞限制在图案化的区域生长，形成细胞图案。基于上述两种原理，各种细 胞图案化技术相继出现并得到发展嵋!。 在众多的图案化技术中，细胞大多被固定在二维平面。人们发现基底的形貌和物理性质会对细胞 的功能产生很大的影响，而且大部分高等动物细胞(除血球细胞等少数几种细胞)都是贴壁生长的，这 为图案化技术在生物学领域的应用奠定了基础。在基础生物学方面，图案化技术可以建立两种或两种 以上的细胞共培养体系，已成为揭示细胞与细胞以及细胞与基底相互作用基本机理的有力工具。另一 方面，图案化能将细胞精确定位在表面，这将在很大程度上促进细胞传感器和分子传感器的发展。目 前，二维细胞图案化技术已在生物学领域受到广泛关注。 2细胞图案化的方法 ， 2．1光刻技术 光刻技术最初应用于半导体产业中，该技术利用紫外光将掩膜上的几何图案转移到基底上(见图 1)。首先在基底上铺一层光敏聚合物——光刻胶，然后基底在光掩膜覆盖下曝光显影形成图案。表面 修饰材料(如蛋白质等)吸附在基底表面后，将基底浸入到有机溶剂中洗脱光刻胶，即可在底面上形成 表面修饰蛋白质的图形，细胞会按照已修饰的图形粘附和生长，形成细胞图案b]。 光刻技术以其较高的精确度成为固体表面图案化的主要手段。但是，光刻过程需要洁净空间和昂 贵的设备，并且对于实验者要求较高，限制了其在生物技术方面的广泛应用。此外，光刻加工过程采用 的化学溶剂容易使生物大分子变性，使它们失去活性Mj。 2．2软刻蚀技术 印章，达到复制微米甚至纳米尺度结构的目的(图2)。 与光刻技术相比，软刻蚀最大的优点在于制作过程更简便[6】。软刻蚀仅需要在制备底模时做一次 2009-02-07收稿；2009-03-23接受 科学基金、王宽诚教育基金资助 }E-mail：xingyujiang@nmloctr．cn 万方数据万方数据 分析化学 第37卷 光刻，而其后的过程在普通实验室就可完成，将对洁 净空间的要求降到最低。因为底模和印章可被重复 利用，软刻蚀比光刻更加经济、方便和有效。此外， PDMS的弹性可以使它容易在曲面和外形可变的基 底上进行图案化，透明、自发荧光低的特点使得某些 样品可在光学显微镜下直接观察。软刻蚀的这些优 点使它正成为细胞图案化的主要方法，常用到的有 微接触印刷、微流控图案化以及模板图案化；其中微 接触印刷、微流控以及上述的光刻都属于通过表面 修饰形成图案化的方法，障碍物限制细胞迁移来实 现图案化的方法。 2·2·1 微接触印刷 微接触印刷(microcontact 图1光刻进行表面图案化的过程… p