Opposite effects of fear conditioning and extinction on dendritic spine remodelling恐惧记忆与树突脊.ppt

Opposite effects of fear conditioning and extinction on dendritic spine remodelling 主要内容：恐惧条件反射诱导了树突棘的丢失，恐惧条件反射的消失引起树突中稳定树突棘曾经所在的同一区域中树突棘的再生长。 Nature, 2012 背景知识 一、巴甫洛夫的条件反射 二、杏仁核与恐惧 三、锥体细胞 四、树突棘与学习记忆 五、双光子显微镜 巴甫洛夫的条件反射 freezing response CS: auditory cue US: footshock paired Fear conditioning extinction unpaired 杏仁核 杏仁核是学习和记忆恐惧事件的关键部位: 1、切除杏仁核，动物出现“心理性失明”：通过视觉看到的东西 不知是否可以吃，必需放到嘴里才知道；“过度变态”：反复察看、触摸或以口检查各种物体，包括原先所畏惧的活蛇或活鼠；情感性行为发生显著变化或所有的情感反应完全丧失。 2、用神经毒性药物证实，损坏中央核、外侧核和基底外侧核的神经元抑制恐惧的学习。 3、在人类神经影象学实验中，条件刺激增加杏仁核区域的血流量 ，在恐惧条件反射和恐惧消除测试的早期阶段最明显。 条件性刺激和非条件性刺激产生联系的关键部位是杏仁核外侧核区。 锥体细胞 大脑皮层有140亿左右的神经元，主要是锥体细胞、颗粒细胞及梭形细胞。神经细胞分层排列，一般从浅至深分为6层： （1）分子层，细胞很少，但有许多与表面平行的神经纤维。 （2）外颗粒层，主要由许多小的锥体细胞和星状细胞组成。 锥体细胞 （3）锥体细胞层，主要为中型和小型的锥体细胞。 （4）内颗粒层，由星状细胞密集而成。 （5）节细胞层，主要含中型及大型锥体细胞：在中央前回的锥体细胞特别大，它们的树突顶端伸到第一层，粗长的轴突下行达脑干及脊髓，组成锥体束的主要成分。 （6）多形细胞层，主要是梭形细胞。 实验动物：C57BL/6 mice expressing YFP in layer-V pyramidal neurons (H-line) frontal association cortex（FrA）：额叶皮层联合区 树突棘与学习记忆 一、树突棘的形成消失与学习记忆中密切相关： 1、在复杂的环境中饲养的大鼠树突棘的密度较高。 2、智障儿童脑中存在许多未成熟的树突棘。 3、突触兴奋时所表现出的可塑性与学习及记忆形成过程相似。 4、………………. 二、树突棘新生时, 先突起一个伪足, 随后伪足与突触前末梢结合形成突触, 最后缩成长1 ～2μm 的成熟树突棘。 树突棘与学习记忆 三、要确定树突棘与记忆获得(或巩固) 的相关性, 必须具备以下条件： 1、记忆的改变与树突棘的改变具有时间上的同步的。 2、记忆的改变与树突棘的改变具有数量上是平行的。 3、记忆获得或消失，树突棘改变在空间上是一致的。 4、特定记忆改变，树突脊的改变在选择上是专一的。 双光子显微镜 激光共聚焦显微镜的局限和缺点： 1、光漂白：高强度的激光会使荧光染料在连续扫描过程中迅速褪色。 2、光毒作用：产生大量单态氧或自由基。 双光子显微镜是一种对活体组织进行荧光成像的新技术。 Whether fear conditioning affected spine formation and elimination in FrA? paired group: 声音+电击（配对） unpaired: 声音+电击（不配对）tone-only: 只有声音 shock-only: 只有电击 分 组 行为学检查 双光子显微镜观察FrA树突脊 1、仅“paired group”产生fear conditioning 2、 fear conditioning至少可以维持9天 实验1 1、仅paired group树突脊消失 2、树突脊消失至少可以维持9天 3、树突脊新生无统计学意义 4、伪足的形成和消失无统计学意义 48小时后 恐惧条件反射诱导了树突棘的丢失 1、Spine elimination (%)与Freezing (%)成正比，并可维持9天。 2、Spine formation (%)与Freezing (%)不成正比。 实验1 ， 实验2， 实验3， 实验4， 实验5 Why FrA? (额叶皮层联合区) First, we observed reciprocal connections between the mouse FrA and amygdala (Fig. 1b, c and Supplementary Figs 1 and