基因靶向改造技术的发展和其意义——解读2007年诺贝尔生理学或医学奖.pdfVIP

##o一’“3一+一一 二o 2…～一一《。女# P1日替恭鬻…b 雾·2007年诺贝尔奖介绍·i wwⅥpibb．ac．cll 基因靶向改造技术的发展及其意义 ——解读2007年诺贝尔生理学或医学奖 高翔。 哺京大学模式动物研究所，南京210061) 瑞典皇家科学f党诺贝尔奖委员会于2007年1o月8日宣布将2007年度诺贝尔生理学或医学奖授予美国科学家马里奥·卡 佩奇删arioR．ca口ecchi)和奥利弗·吏密西斯(0“versⅢithies)，英国科学家马丁·埃吏斯(MartinJ．Evans)，以表 彰他们在建立利用胚胎干细胞进行小鼠基因靶向改造的技术方面所作的贡献．目前基因靶向改造技术已经广泛应用于生物医 学的各个领域，夸后这一技术仍将对深入开展基因功能研究产生极大的促进作用，同时随着在疾病动物模型建立、基固治疗 等领域的应用，它也必将为医学的发展和人类健康带来好处． 2007年诺贝尔生理学或医学奖颁给了在小鼠个体，由于部分Es细胞可能分化为配子细胞，该 基因组建立基因靶向改造技术的三位科学家，美国 个体与野生型小鼠的进一步交配将可以得到所有细 科学家马里奥·卡佩奇(MarioR．Capecc“)和奥利胞均携带有定点改造的基因组的动物个体． 弗·史密西斯(olivcrSm汕ies)、英国科学家马丁·埃 从理论到实际操作，这项技术使科学家可以在 文斯rManinJ．Ev∞曲Ⅲ．这几乎是一项毫无争议的奖 基因组水平按设计实现所有类型的DNA序列改 励，这不仅是由于三位科学家对这项技术的开创性 造；从单碱基突变到几十万个碱基的颠换和剔除． 贡献为世人公认，更是因为这项技术的发明建立了 因此，这项技术不仅仅可以用来分析基因功能，还 基因功能验证的金标准，因而该技术也成为了功能 可以分析任何我们感兴趣的基因组结构的功能，包 基因组研究的核心方法．就像PcR技术的发明促使 括小RNA编码区及保守的非转录区域(如增强子 分子生物学研究进入世界上最普通的实验室，基因 序列)等． 靶向改造技术使这些普通的实验室可以利用基因剔 然而，这项技术的核心价值，主要不是基于其 除小鼠在整体动物水平开展深入的基因或特定基因 复杂的操作过程，更是基于其独特的操作材料，这 组序列的功能研究．同时，这项技术的产生，为疾 个材料就是试验用小鼠．小鼠作为目前最重要的模 病动物模型建立、动物克隆、基因治疗和干细胞等 型动物，其生理生化指标和人类非常相近，其基因 多个领域的研究提供了全新的视角和开辟了广阔的 组和人类基因组也高度同源，所以是构造人类疾病 空间． 模型的最佳实验动物对象．因此，在小鼠体内实现 基因靶向改造技术的实质是对特定的基因序列 基因组改造的意义和应用价值，远远大于在大肠杆 进行定点的分予生物学改造．这些改造包括“基因 菌和酵母实现该技术的意义．在我看来，这其实是 hlock∞t)”——破坏某个基因或特定的三位科学家获奖的关键原因． 剔除(脚e 基因组序列，及“基因替换(genelmoc“亩”——和人类基因组一样，小鼠基因组也编码约 30 用一段设计好的序列整合到或替换动物基因组的特 000个基园，据分析，约99％的人类基因可以 定位点．基因靶向改造技术主要分为两个步骤 在小鼠基因组找到同源基因，而这些基因的序列的 (图1)；在具有分化全能性的胚胎干细胞皿s细 胞)中通过同源重组的方法实现基因靶向的基因组 ·通讯联系人 定点改造；b．将改造的Es细胞通过显微注射或聚