Gadd45_对绒毛外滋养细胞迁移和侵袭能力影响的相关研究_刘西茹.pdfVIP

nalofChongqingMedicalUniversity.Vol.No.11） 重庆医科大学学报 年第 卷第 期（Jour 2014 39 — 1516 — 2014 39 11 ki.cyxb.000253 生殖医学 DOI：10.13406/ Gadd45对绒毛外滋养细胞迁移和侵袭能力影响的相关研究 α 1 2 1 1 刘西茹 ，慕华桥 ，罗 欣 ，漆洪波 （重庆医科大学附属第一医院妇产科，重庆 ； 重庆市妇幼保健院医务科，重庆 ） 1. 400016 2. 400013 【摘 要】目的：研究人生长阻滞和 损伤 （ ， ）基因对滋养细胞 DNA 45α growth arrest and DNA damage 45 alpha Gadd45α HTR8/SV－ 增殖、凋亡、迁移和侵袭等生物学功能的影响，探讨其在子痫前期（ ， ）发生发展中的可能作用。方法：构建 neo preeclampsia PE 短发夹干扰 ，以阴性对照组作为参照，转染人滋养细胞 ，即分为实验组（ ）和阴性对照组 Gadd45α RNA HTR8/SVneo si-Gadd45α （ ）进行实验；应用流式细胞仪检测转染效率，并应用 和 检测转染后各组细胞中 和 si-NC qRT-PCR Western blot Gadd45α mRNA 蛋白表达水平；采用四甲基偶氮唑蓝（ ， ）显色法检测转染后各组细胞增殖能力；应用流式细胞仪 methyl thiazolyl tetrazolium MTT 对转染后各组细胞进行细胞凋亡分析；采用Transwell 法检测转染后各组细胞迁移和侵袭能力；采用早孕绒毛外植体培养模型 观察敲除Gadd45α 基因后对绒毛外滋养细胞外生性迁移能力的影响；收集各组细胞培养上清液，明胶酶谱法检测基质金属蛋 白酶（ ， ）的表达，蛋白免疫印迹检测基质金属蛋白酶组织抑制因子（ ， ） matrix metalloproteinases MMPs tissue inhibitors of MMPs TIMPs 的表达。结果：流式细胞仪检测转染效率约为90％；转染后实验组