菌落总数的测定-11-29菌落计数.pptVIP

酱油中菌落总数的测定 ——菌落计数、计算与报告 复习提问 1、菌落总数的测定步骤 2、测定酱油中菌落总数时稀释度选择的原则是什么？ 3、本次酱油中菌落总数测定实验的设计？ 表1酱油中菌落总数的测定结果与报告 主要内容 一、平板菌落计数的原则和方法 二、各组进行菌落计数，并填表 三、菌落总数计算方法 四、学生练习计算方法 五、报告方法 六、各组进行报告 一、平板菌落计数的原则与方法 （一）原则 1、平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用 2、?若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，则可以计算半个平板后乘以2，以代表一个平板的菌落数 3、若菌落分布均匀，300以下的平板直接进行菌落计数，大于300的可记为多不可计。 4、当平板上有链状菌落生长时，且无明显界限的，则每条链均应按一个菌落计算。 （二）菌落计数方法 1、肉眼观察，记号笔点数，300以下的记录具体数据；300以上的可以不计数，写“多不可计”。 2、多，密，且均匀，可以分四个小格，数一个小格，乘以4。 3、可以使用放大镜观察。 图2、菌落计数方法 二、各组进行菌落计数，并填表 三、稀释度的菌落数计算 1、若两个平板均为“无法计数”，则填“无法计数”。 2、若一个平板“无法计数”，则用另外一个平板菌落数代表该稀释度菌落数。 3、若两个平板都有具体数据，则求平均，用整数表示。 三、稀释度菌落数的计算 四、菌落总数的计算方法 稀释度：原溶液被冲淡的程度。 稀释倍数：溶液被稀释的倍数。 例如：稀释度为10-1和10-2， 即1:10, 1:100 稀释倍数依次是10倍，100倍。 四、菌落总数的计算方法 1、选择稀释度菌落数在30~300之间的，若只有一个，则用该稀释度菌落数乘以相应稀释倍数 2、若所有稀释度的平板上菌落数都大于300CFU，则对稀释度最高的平板进行计数，结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数计算。 3、若所有稀释度的平板菌落数均小于30CFU，则应按稀释度最低的平板菌落数计算。 4、若所有稀释度平板均无菌落生长，则以小于1乘以最低稀释倍数计算。 5、若所有稀释度的平板菌落数一部分小于30CFU或大于300CFU时，则以最接近30或300的平均菌落数乘以稀释倍数计算。 6、若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时，按如下公式计算：N=∑C/（n1+0.1n2）d…………（1 ) 式中：N ― 样品中菌落数；∑C ― 适宜计数范围内平板菌落数之和；nl ― 第一个适宜稀释度平板数；n2 ― 第二个适宜稀释度平板数；d ― 稀释因子（第一稀释度）。 五、报告原则 1、菌落数小于100CFU时，按照“四舍五入”原则修约，以整数报告。 2、菌落数大于或等于100CFU时，第3位数字采用“四舍五入”原则修约后，取前2位数字，后而用0代替位数；也可以用10的指数形式来表示，按照“四舍五入”修约后，采用两位有效数字。 五、报告原则 3、若所有平板上为蔓延菌落而无法计数，则报告菌落蔓延。 4、若空白对照上有菌落生长，则此次检测结果无效。 5、单位：称重的样品，用CFU/g； 量取体积的样品，用CFU/ml。 CFU——菌落形成单位 六、菌落计数方法练习 * 样品制备 10倍梯度稀释 接种 倒平板 倒置培养 菌落计数 报告 菌 落 总 数 测 定 步 骤 菌落总数计算 平板菌落计数 计算 菌落总数 稀释度菌落数 稀释度菌落数 稀释度菌落数 平均 平板菌落计数 平板菌落计数 平板菌落计数 平板2 方式 平板菌落计数 平板菌落计数 平板菌落计数 平板菌落计数 平板1 报告 空白 10-3 10-2 10-1 稀释度 不可计数 不可计数 64 图1、菌落计数原则 平板菌落计数 菌落总数 平均 平板菌落计数 平板菌落计数 平板菌落计数 平板2 平板菌落计数 平板菌落计数 平板菌落计数 平板菌落计数 平板1 报告 空白 10-3 10-2 10-1 稀释度 27 菌落总数 平均 288 多不可计 无法计数 平板2 28 无法计数 无法计数 无法计数 平板1 报告 例4 10-4 例3 10-3 例2 10-2 例1 10-1 稀释度 无法 计数 多不 可计 288 28 稀释度高 5 10-2 10-3 10-4 1 平均菌落数 380 52 18 10-3 52000 2 无法 计数 568 312 10-4 3120000 3 26 12 5 10-2 2600 4 0 0 0 10-2 100 6 多不 可计 287 34 10-3，10-4 试样例次 315 稀释度 29 2 选定计数 稀释度 菌落总数/(CFU/mL