(2014-3-4)气相色谱定量基础简介-.pptVIP

归一化法(NORM) 假定 所有组分都流出 所有组分都被检测到 优点 缺点 进样量不要求严格 所有组分峰都要流出 需测量所有的组分 必须校正所有的峰 内标法(ISTD) 试样配制：准确称取一定量的试样W，加入一定量内标物mS 计算式： 假定 RF值的比值(相对RF值)恒定 优点 进样量不严格要求 只对欲分析的组分峰做校正 校正检测器的响应 缺点 必须加一个组分进到样品 外标百分比法、内标百分比法 采样前在“样品信息”中输入“样品量”。 而且选择对应的报告格式“外标百分比法”或“内标百分比法”。 选择内标物的标准 1. 样品中不存在 2. 可迅速容易得到 3. 化学性质与样品相似 4. 与样品有相似的响应值(浓度范围) 5. 不会与样品发生反应 6. 在感兴趣组分附近流出 7. 可得到分离良好的、干净利落的峰 8. 色谱性质稳定 * 本次培训结束谢谢大家！ 可以回忆、对照利用坐标纸绘制工作曲线的过程，工作站的校正、定量过程与之完全类似。 * 1.感兴趣组分即欲分析、定量的组分（化合物） 2.标样最好是混合标样，即将各个化合物的纯品事先混和，配成混和标样 3. “需要时进行再校正” ，理解“需要时”的含义：使用控制样品Control Sample衡量工作曲线是否仍然适用，是否需要再校正。 * 单级校正：即单点校正、单点法。仅有一个浓度的标样，无论进样几针取平均值，只要浓度相同，都相当于只做一次校正。 单点校正的两种假设都不尽合理，使得单级校正定量结果不准确。但其具有简单、快速的优点，常适用于以下情况： 1.做简单的粗定量 2.当未知样品的浓度小于且接近于标样浓度时，所得定量结果较准确 3.主要用于检出实验，即不需要准确定量未知样品含量，只关心未知样品是否达标 * 多级校正纠正了单级校正的缺点，可以进行准确定量。气相色谱里面常用的多级校正为五级校正（即五点法）。 * 一定先准备一个浓度高于未知样品浓度的浓标样。而且最终标样的浓度范围应包含未知样品的浓度。 * 利用最小二乘法进行线性拟合是最常用的拟合方式。 * 如上所示，化学工作站提供的定量方法共有六种。 * 百分比法常用于粗定量，或用于组分简单、结构相似的混合物分析，以及无法找到标准样品时的分析。 百分比法也可用于科研中的探索性研究以及平行比较实验（如：比较不同产地的枸杞子中有效成分的含量多少）。 * 通过引入RF值，校正不同样品对检测器的不同响应，可以克服百分比法的致命缺陷。 * 定量的前提假设是：标样中、未知样品中待测组分的RF值相同。 使用外标法时，必须保证进样量准确！！！除非使用手动进样器的满刻度进样模式(用定量环进样)，否则不推荐利用手动进样所得数据进行外标法定量。 要求仪器必须具有良好的稳定性，而且应定期进行再校正，否则标样的RF值和未知样品的RF值不相等，就无法进行准确定量。 * 如果需要，也可使用、加入多个内标物，用于内标定量。 要注意内标和样品应具有相近的浓度范围，以得到相近的响应值。 * 各种定量方法总结 外标百分比法(ESTD%)和内标百分比法(ISTD%)是在外标法或内标法的定量基础上，用所得化合物的含量除以样品总含量，得到该化合物的百分含量。 样品量：该值仅用于外标百分比法(ESTD%)和内标百分比法(ISTD%)的定量计算。 内标量：用于内标法(ISTD)和内标百分比法(ISTD%)的定量计算。 乘积因子及稀释因子：参与所有定量计算方法，在正式给出报告前，工作站会自动将所得结果分别乘以这两个数值，然后再给出计算结果。也就是说：报告中样品含量＝定量计算所得值×乘积因子×稀释因子 * 气相色谱定量方法 * 校正概念 校正的必要性 如何进行校正 各种定量方法计算公式及优缺点 校正的概念及校正的必要性 校正即是利用某个峰的峰高或峰面积来确定其对应 组分的浓度或含量 当检测器灵敏度针对不同的组分而变化； 检测器对同一组分不同含量响应值发生变化时须做校正 校正的过程 首先准备一个混合标样，其中感兴趣组分的浓度须准确知道 运行标准样品 建立校正表 运行待测样品并使用校正表分析它 需要时进行再校正 单级校正 对每一峰只做一次校正 单级校正中做了如下假设： 响应因子不会因为某峰对应物质的含量变化而发生变化 响应曲线须通过原点 单级校正工作曲线 含量 响应值 (A或H) 多级校正 对每一峰需做至少两次校正 可以补偿检测器对不同含量的样品组分而给出非线性响应 响应曲线可以不通过原点 多级校正的过程 首先准备一个混合标样，其浓度应高于欲