徐龙龙 苜蓿中总黄酮提取工艺的优化.pptVIP

苜蓿中总黄酮提取工艺的优化 姓 名：徐龙龙 班 级：应用化学11101 学 号 指导老师：陈兵兵 张书奎 本实验的不足之处 不足： 1、可能还有其它单因素对提取黄酮有很大影响。例如pH 2、在单因素的基础上仅做了3组正交试验，实际生产中应全面考虑所有未知量。 3、本实验是一种分析方法，未最终提取出黄酮类化合物。 4、未能对各种方法进行比较，没确定出最佳分析方法。 解决办法 1、同组其他同学进行弥补，如沈林明同学水提法中对pH等进行了分析，张涛同学对各种方法进行了评价。 2、对实验进行创新，以最大限度提取黄酮量为指标，用科学的手段，合理的构思，对提取工艺进行深入研究。 3、在完成论文任务后，进一步研究。（我们做了减压蒸馏提取实验） 4、查阅相关文献进行思维扩展。（如响应面法对正交试验结果在MATLAB的分析） 1、实验目的和意义 2、实验过程 3、结果与讨论 实验内容 1、实验的目的和意义 苜蓿主要种植在我国青海、新疆、宁夏、甘肃等地，它具有适应性强、产草量高、营养丰富、易于家畜消化等特点而被广泛种植。 苜蓿中含有多种生物活性成分，黄酮化合物是其主要活性成分之一，它不但具有杀菌、消炎、抗肿瘤、抗癌、降血压等功效，而且有雌激素的作用，在畜牧业中能显著提高动物生产性能。 宁夏地区对紫花苜蓿种植较多，但对黄酮提取工艺研究的报道很少；由于地域的差异使其生物活性成分的含量有所不同，导致提取方法有所不同。 本论文以宁夏盐碱地种植的紫花苜蓿为研究对象，采用单因素及正交试验，对固液比、乙醇浓度、提取时间及温度对苜蓿中总黄酮提取量的影响进行研究，目的是优选出最佳提取工艺条件，为宁夏地区苜蓿进一步开发利用提供理论参考。 2、实验过程 （1）最佳波长的选择： 准确称取基准物质芦丁35.7 mg，用30%的乙醇液溶解后，定容到250 mL的容量瓶中；以30%的乙醇为参比试剂，对上述样品溶液在200-700 nm之间进行光谱扫描，找出不同波长下基准物质芦丁的最大吸光度。 结果发现标准物芦丁在380 nm处吸光度最大，所以测量波长定为380 nm。 （2）标准曲线的制备 准确移取上述标准液25.00 mL，用30%的乙醇定容到50 mL的容量瓶中。用移液管分别移去0.00 mL、1.00 mL、2.00 mL、3.00 mL、4.00 mL、5.00 mL、6.00 mL的标准溶液到10 mL的容量瓶中，以30%的乙醇做参比，分别测定其吸光度，建立标准曲线。 标准曲线方程为：A = 0.0046 + 20.7918×C0 ； R2 = 0.99987 （3）单因素对苜蓿总黄酮提取工艺的影响 （A）固液比对总黄酮提取的影响： 准确称取1.00 g 的苜蓿5份，分别用固液比为1:10、1:20、1:30、1:40、1:50的30%的乙醇溶液浸泡24 h，然后在60℃的条件下加热回流1 h，用活性炭脱色后过滤收集滤液，用30%的乙醇溶液定容于100 mL容量瓶中，摇匀后取2 mL溶液定容于10 mL容量瓶，测量吸光度考察固液比对提取黄酮的影响。 由上图得：在固液比为1:40时总黄酮的提取量最好 （B）乙醇浓度对总黄酮提取的影响: 准确称取1.00 g的苜蓿5份，按照（A）的检测方法，分别用30 mL浓度为30%、40%、50%、60%、80%和100%的乙醇溶液提取总黄酮，结果如下所示。 （C）温度对总黄酮提取的影响： 准确称取1.00 g的苜蓿8份，按照（A）的检测方法，分别在30℃、40℃、50℃、60℃、70℃、80℃、90℃和100℃的条件下提取总黄酮，结果如下所示。  （D）时间对总黄酮提取的影响： 准确称取1.00 g的苜蓿5份，按照（A）的检测方法，分别在2 h、3 h、4 h、5 h和6 h的条件下加热回流提取总黄酮，结果如下所示。 （5）正交试验考察苜蓿总黄酮提取工艺 （A）正交试验的设计： 由于苜蓿的提取量受到回流时间、温度、固液比和乙醇浓度4个因素的综合影响，为了全面研究4个因素的影响，根据单因素实验结果，以苜蓿的提取量为考察指标，设计L9(34)正交试验，正交实验设计表如下： 70 70% 1:50 6 3 60 60% 1:40 5 2 50 50% 1:30 4 1 温度 （℃） 乙醇 浓度 固液比 （g/mL） 时间 （h） 水平 （B）正交试验的结果表： 7.9538 1 2 3 3 9 8.7813 3 1 2 3 8 6.111