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几种石斛粗提物抗凝抗血栓作用对比探究 　　摘要：目的：对比研究几种石斛粗提物的抗凝和抗血栓作用。方法：采用毛细管法测定凝血时间和胶原-肾上腺素致体内血栓形成法，分别测定几种石斛粗提物的抗凝、抗血栓作用。结果：除报春石斛和翅梗石斛外，所有给药组均能显著延长小鼠全血的凝血时间，而报春石斛有一定延长趋势；除报春石斛和翅梗石斛外，所有给药组均能显著对抗胶原-肾上腺素诱导小鼠的体内血栓形成，使动物死亡率明显降低，报春石斛和翅梗石斛仅有一定作用趋势。结论：除报春石斛和翅梗石斛外，鼓槌石斛、长距石斛、球花石斛、玫瑰石斛、叠鞘石斛、黑毛石斛、流苏石斛、金钗石斛均有较好的抗凝、抗血栓作用。 关键词：石斛粗提物；抗凝；抗血栓 中图分类号：R285.6文献标识码：A 文章编号：1007-2349（2012）12-0061-02 石斛属（DendrobiumSw.）是兰科植物中的第二大属，全球共有大约1000 种，我国有74种2变种，主要分布在华南及西南地区，尤其以云南南部为多[1]。石斛是业内外人士都熟知的常备药品的必需原料，应用于脉络宁注射液、石斛夜光丸、通塞脉片、石斛散等数十种中成药。脉络宁制剂具有活血化瘀的功能，是利用石斛的“除痹”功效，笔者选择简单、经济、快捷的小鼠凝血时间测定，胶原-肾上腺素致体内血栓形成，观察与比较几种石斛粗提物的抗凝、抗血栓作用，初步评价其对心血管活性。 1实验材料 1.1样品 1.1.1受试物鼓槌石斛SHch（Dendrobium chrysotoxum），棕色浸膏，提取率3.15%；金钗石斛SHn（D.nobile），棕色浸膏，提取率5.42%；翅梗石斛SHtr（D.trigonopus），棕色浸膏，提取率4.34%；长距石斛SHl（D.longicornum），棕色浸膏，提取率4.16%；报春石斛SHp（D.primulinum），棕色浸膏，提取率13.81%；球花石斛SHth（D.thysiflorum），棕色浸膏，提取率11.80%；玫瑰石斛SHcr（D.crepidatum），棕色浸膏，提取率121.11%；叠鞘石斛SHd（D.denneanum），棕色浸膏，提取率13.24%；黑毛石斛SHw（D.williamsonii），棕色浸膏，提取率11.39%；流苏石斛SHf（D.fimbriatum），棕色浸膏，提取率14.27%；由中科院昆明植物研究所提供。所有样品均为60%乙醇提取物，易吸湿，常温密闭保存。 1.1.2对照药品阿斯匹林肠溶片（拜阿斯匹灵，进口药品注册证号100mg/片，Bayer Health Care AG生产，批号BTA6ZB7）。 1.1.3配制方法各种石斛粗提物按提取率折算成6.0 g/kg的生药剂量为实验的给药剂量，临用前称取适量样品于乳钵中，用1%CMC-Na研磨后配制成相当于生药0.30 g/mL浓度的混悬液供小鼠灌胃用；阳性对照阿斯匹林的配制方法同石斛粗提物。为保证受试物的稳定性，所有样品均为临用前新鲜配制。 1.2动物SPF级昆明种小鼠，全雄，体重18～24 g，购自于昆明医学院实验动物中心。合格证号：SCXK（滇）2005-0008。 1.3主要仪器AL104电子分析天平（称量试剂、药品、脏器），梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司；JJ2000型电子天平（称量动物体重），常熟双杰测试仪器厂；Millipore超纯水处理系统，美国Millipore公司；BCD-225E冰箱，青岛海尔冰箱厂。 1.4主要试剂胶原蛋白，美国Worthington生化集团，批号35E8048-B；盐酸肾上腺素注射液，国药准字1 mg/mL，天津药业集团新郑股份有限公司，批号0909102；溴代苯，分析纯，中国青浦合成试剂厂出品，批橄揽油，化学纯，中国医药集团上海化学试剂公司出品，批 1.5统计学处理实验结果以均值±标准差（ ±s ）表示，用DAS ver1.0统计软件进行数据处理。方差齐用t检验，方差不齐用t′检验；偏态分布资料用秩和检验；计数资料用χ2检验。 2方法与结果 2.1对小鼠全血凝血时间的影响选用18～20 g雄性昆明种小鼠132只，按体重随机分为12组：空白对照组；阳性对照阿司匹林40 mg/kg组；10种石斛样品粗提物6.0 g/kg组；每组11只。各组动物每日分别按6.0 g/kg干燥药材剂量灌胃给药1次，连续3 d，空白对照组灌服等容量1%CMC-Na 20 mL/kg.bw。末次给药后1 h，用20 uL采血管于每鼠眼后静脉丛取血，以毛细管法测定凝血时间[2]。结果见表1。结果显示：除翅梗石斛外，所有给药组