黏虫热休克蛋白Hsp90基因的克隆及不同温度对其诱导反应.pdfVIP

33(5)623-630 中国生物防治学报 Chinese Journal of Biological Control 2017 年 10 月 黏虫热休克蛋白Hsp90基因的克隆及不同温度对其诱导反应 杨 静，Nasir Ali Baloch ，樊 东* （东北农业大学农学院，哈尔滨 150030 ） 摘要：热休克蛋白是昆虫体内一种很重要的抗逆蛋白，Hsp90 是热休克蛋白家族中的重要成员。本试验利 用高通量测序法获得Hsp90 的cDNA 的全长序列，通过Real-time PCR 探讨黏虫各龄期、组织和黏虫3 龄 幼虫受到不同高、低温胁迫不同时间的Hsp90 基因的相对表达量。在黏虫体内得到Hsp90 的cDNA 全长序 列（GenBank 登录号MF773751 ）2422 bp ，命名为MsHsp90 ，编码717 个氨基酸，分子量约为82.576 ku， 等电点是4.98 ，序列包含有Hsp90 的保守序列，与鳞翅目夜蛾科的甜菜夜蛾、苜蓿夜蛾、斜纹夜蛾亲缘关 系较近，且氨基酸序列相似性都在98% 以上。Real-time PCR 结果显示黏虫的不同发育阶段和组织中均有 MsHsp90 表达，其中2 龄幼虫和后肠的相对表达量最高。40 ℃处理6 h 的相对表达量最高，处理12、24 、 48 h 时，20 ℃的相对表达量最高。上述分析可知，MsHsp90 相对表达量的高低表明在黏虫不同组织，不 同发育阶段和不同时间、温度处理中发挥的作用存在差异。 关 键 词：黏虫；热休克蛋白Hsp90 ；温度胁迫 中图分类号：S433.4 文献标志码：A 文章编号：1005-9261 (2017)05-0623-08 cDNA Cloning and Induction of Heat Shock Protein Hsp90 from Mythimna separata * YANG Jing, NASIR Ali Baloch, FAN Dong (College of Agronomy, Northeast Agricultural University, Harbin 150030, China) Abstract: Heat shock proteins are key elements of the organism’s adaptive response to adverse environments. Hsp90 has an important place in the Hsp superfamily. Full length of Hsp90 cDNA sequence was obtained from Mythimna separata by using high-throughput sequencing. Hsp90 mRNA transcripts in M. separata were examined at various developmental stages and in different tissues based on real-time PCR. Hsp90 mRNA expression levels were also examined to different temperature treatments. The results showed that the cDNA sequence of Hsp90 in M. separata is 2422 bp and encodes 717 amino acids. The molecular mass is about 82.576 ku, and isoelectric point is about 4.98. The amino acid sequence