副溶血弧菌vibrioparahaemolyticus中溶源噬菌体-渔业科学进展.pdfVIP

第37 卷 第2 期 渔 业 科 学 进 展 Vol.37, No.2 2 0 1 6 年 4 月 PROGRESS IN FISHERY SCIENCES Apr., 2016 DOI: 10.11758/yykxjz.20150417002 / 副溶血弧菌( Vibrio parahaemolyticus) 中溶源 噬菌体与其宿主菌致病力的相关性* 1,2 1 1 1,2,3① 4 王 娜 王海亮 白 楠 黄 倢 谢达祥 5 5 6 谢起浪 於俊琦 万夕和 (1. 中国水产科学研究院黄海水产研究所 农业部海洋渔业可持续发展重点实验室 青岛 266071 ； 2. 上海海洋大学水产与生命学院 上海 201306 ；3. 青岛海洋科学与技术国家实验室 海洋渔业科学与食物产出过程功 能实验室 青岛 266237 ；4. 广西水产科学研究院 南宁 530021 ；5. 浙江省海洋水产养殖研究所 温州 324005 ； 6. 江苏省海洋水产研究所 南通 226007) 摘要 急性肝胰腺坏死病(Acute Hepatopancreatic Necrosis Disease, AHPND)是由副溶血弧菌 ( Vibrio parahaemolyticus) 引起的对虾病害，本研究从患AHPND 的凡纳滨对虾样品中分离得到5 株副溶血弧菌，采用致AHPND 的副溶血弧菌(VPAHPND) 的相关质粒的引物AP2 进行PCR 检测， 表明这5 株菌中均存在AHPND 相关质粒。利用丝裂霉素C 进行溶源性噬菌体筛选和噬菌体诱 导发现，其中2 株副溶血弧菌(20130629002S01 和20130726001S01) 可能存在溶源性噬菌体感染； 从经0.5 μg/ml 丝裂霉素C 诱导的20130629002S01 和20130726001S01 中分别分离得到两种噬 菌体phage1 和phage2 。透射电镜观测显示，phage1 为有尾噬菌体，phage2 为球形噬菌体。将 上述5 株副溶血弧菌进行卤虫无节幼体人工感染实验，结果显示，它们对卤虫无节幼体均有致 病力，且各分离株的毒力表现出显著性差异；20130629002S01 和20130726001S01 两株带有溶 源性噬菌体的副溶血弧菌的致病力显著低于无噬菌体的副溶血弧菌(20130721001S02) 。本研究 结果表明，5 株 VPAHPND 分离株都含有 AHPND 相关的质粒，表现出显著的毒力差异，可能携 带不同的溶源噬菌体，也可能不携带溶源噬菌体，溶源噬菌体与副溶血弧菌各分离株的毒力并 无必然相关性。 关键词 副溶血弧菌；溶源噬菌体；急性肝胰腺坏死病 中图分类号 S917 文献标识码 A 文章编号 2095-9869(2016)02-0105-06 急性肝胰腺坏死病(Acute Hepatopancreatic 给亚洲各国对虾养殖业造成巨大经济损失。因此，对 Necrosis Disease, AHPND) ，又称早期死亡综合征 AHPND 病原的探究引起了国内外学者的广泛关注。 (Early Mortality Syndrome, EMS) ，是一种严重危害养 本实验室最早在 2010 年从广西北海大规模死亡的凡 殖对虾的疫病(Lightner et al, 2012) 。该病最早于2010 纳滨对虾中分离到了一株高抗生素抗性和高致病力 年发生于中国南方和越南，随后在马来西亚和泰国相 的副溶血弧菌( Vibrio parahaemolyticus)( 张宝存等, 继暴发，感染该病的对虾