喀西茄内参基因实时荧光定量pcr表达稳定性评价-园艺学报.pdfVIP

园 艺 学 报 2014 ，41 （8 ）：1731 – 1738 http: // www. ahs. ac. cn Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@126.com 喀西茄内参基因实时荧光定量 PCR 表达稳定性 评价 周晓慧，刘 军，庄 勇* （江苏省农业科学院蔬菜研究所，江苏省高效园艺作物遗传改良重点实验室，南京 210014 ） 摘 要：为了筛选在喀西茄（Solanum aculeatissimum ）中表达稳定的内参基因，选取7 个常用内参基 因 GAPDH、ACTIN 、18sRNA、UBQ、TUA、EF1 和 CYP，利用实时荧光定量 PCR 技术，结合 GeNorm、 NormFinder 和 RefFinder 软件对其在喀西茄不同组织、不同植物生长调节剂处理、非生物和生物胁迫下的 表达稳定性进行评价。结果表明，TUA 和 18sRNA 在喀西茄不同组织中的表达稳定性最好，18sRNA 和ACTIN 在不同植物生长调节剂处理条件下表达水平最稳定，EF1 和 GAPDH 在干旱和盐条件下表达稳定性最好， TUA 和 EF1 在所有喀西茄测试样品组中（包括不同组织、不同植物生长调节剂处理、非生物及生物胁迫） 的表达稳定性最高，而 CYP 和ACTIN 在喀西茄不同试验条件下的表达稳定性较差。 关键词：喀西茄；实时荧光定量 PCR ；内参基因 中图分类号：S 641.1 文献标志码：A 文章编号：0513-353X （2014 ）08-1731-08 Selection of Appropriate Reference Genes in Solanum aculeatissimum for Quantitative Gene Expression Studies Under Different Experimental Conditions * ZHOU Xiao-hui ，LIU Jun ，and ZHUANG Yong （Jiangsu Key Laboratory for Horticultural Crop Genetic Improvement，Institute of Vegetable Crops ，Jiangsu Academy of Agricultural Sciences ，Nanjing 210014 ，China） Abstract ：The present study aimed to select stable and optimal reference genes for gene expression analysis in Solanum aculeatissimum. A total of seven traditional reference genes including GAPDH， ACTIN ，18sRNA，UBQ，TUA，EF1 and CYP were screened and compared by the real-time quantitative PCR. The mRNA levels of these candidate genes were evaluated under different experimental conditions ， including different tissues，different hormone treatments，abiotic and biotic stress using three common statistical softwares，GeNorm，NormFinder and RefFinder. The data showed that TUA and 18sRNA were the most stable genes in different tissues. 18sRNA a