大鼠肝癌演进中凝血因子的可变剪接-四川动物.pdfVIP

四川动物 年 第 卷 第 期 大鼠肝癌演进中凝血因子 的可变剪接 张红绪 刘丹丹 王莉 赵鹏 孙青芸 金白洁 王亚威 河南师范大学生命科学学院河南新乡 摘要为得到未知差异表达基因 全长及探讨其在大鼠肝癌演进中的作用采用末端快速扩增 技术 扩增 端和 端序列产物克隆后测序检索分析所 得序列 结果显示该序列与挪威大鼠 序列 登录号 相似性高达 且 以插入的形式存在于该序列中推测大鼠肝癌演进过程 中凝血因子 可能存在另一种可变剪接的形式 关键词 大鼠肝癌变 可变剪接 中图分类号 文献标识码 文章编号 肝癌的发生发展是多因素多阶段多基因相互作用的 方法 结果 自顾建人等 首次报道基因是原发性肝癌 获取差异片段 分别在轻度炎性增生重度炎性增 及肝癌细胞株中共有的转化基因以来肝癌相关基因的研究 生结节状增生非典型结节状增生和癌 个时期取材用差 迅速发展 迄今为止发现的与肝癌发生发展相关的基因有 异显示反转录法 获取未知差异显示基因 片段 等 总的提取使用提取 本文对大鼠肝癌演进中基因的差异表达进行了相关 大鼠肝组织总 研究获得了差异表达的 对其进行了末端快速 扩增 以 中的总为模板反转录 扩增 和序列分析为 生成 用持家基因引物进行 扩增上游 进一步研究该基因在肝癌发生发展过程中的作用进而确定 引物 下游引物 能否将其作为肝癌新的诊断指标和治疗的靶点提供参考 根据已知序列分别 设计扩增需要的特异性引物和接头引物表 表 使用 材料与方法 和 试剂盒分别进行巢式 材料 产物克隆及菌落鉴定 巢式扩 大鼠 只 级 周龄体重 增反应产物 经琼脂糖凝胶电泳后用凝胶回收试 购自河南省实验动物中心 参照郑杰等 的方法用 剂盒回收胶回收产物与 载体连接转化 二乙基亚硝胺 建立大鼠肝癌 感受态细胞 涂氨苄抗性平板挑取单克隆进行菌落 模型 鉴定确定阳性