枯草芽胞杆菌芽胞表面展示研究进展.pdfVIP

中国生物工程杂志　ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１４，３４（８）：１０５１１１ ＤＯＩ：１０．１３５２３／ｊ．ｃｂ 枯草芽胞杆菌芽胞表面展示研究进展 １ １ １ １ ２ １ 谢志丹 　范　稳 　贾东晨 　杨　娜 　夏振远 　乔　敏 （１云南大学微生物保护与利用重点实验室　昆明　６５００９１　２云南省烟草农业科学研究院　昆明　６５００９１） 摘要　枯草芽胞杆菌芽胞表面展示技术是把枯草芽胞杆菌作为芽胞表面展示的宿主来展示目的 蛋白的一种技术。该技术不仅具备芽胞表面展示技术可展示分子量较大的目的蛋白、目的蛋白 无需跨膜及芽胞的极强抗逆性等特点外，同时由于该技术的宿主菌———枯草芽胞杆菌的分子生 物学信息研究得比较清楚、安全性高而被广泛应用。介绍了枯草芽胞杆菌表面展示近１０年在生 产疫苗和固定化酶方面的进展，并对如何提高表面展示目的蛋白的产量做了简要概述。 关键词　表面展示　枯草芽胞杆菌　抗原　锚定蛋白 中图分类号　Ｑ８１９ 　　芽胞表面展示技术是将外源目的蛋白编码基因与 用范围［６］。较之苏云金芽胞杆菌和炭疽芽胞杆菌展示 含有自身启动子的芽胞外衣壳蛋白基因融合，构建融 系统，有其独特的优势，一方面，枯草芽胞杆菌的分子 合基因表达载体，然后将这种载体转化产芽胞的宿主 生物学信息研究得比较清楚，已建立了完善的遗传操 菌株，得到的重组菌株在生孢培养基中培养时，外源目 作体系，便于重组芽胞的构建；另一方面，枯草芽胞杆 的基因就会在外衣壳蛋白基因启动子的启动下表达， 菌是公认的益生菌，安全性高，可广泛应用于食品和药 ［１］ ［１］ 并通过与外衣壳蛋白融合展示在芽胞的表面 。其结 品领域 。近１０年来枯草芽胞杆菌表面展示系统发 果是，一方面外源目的蛋白能保持相对独立的空间构 展迅速，其应用从最初的抗原疫苗生产，到现在可用作 象和原有的生物活性，另一方面芽胞可表现该外源目 固定化酶的多种酶的表面展示、化学物质和重金属的 ［２］ 生物吸附以及构建生物传感器等多个方面。枯草芽胞 的蛋白的生物活性 。 ［３］ 表面展示技术越来越受到人们的重视，而如何高效大 　　第一个芽胞展示系统是 Ｉｓｔｉｃａｔｏ等 于２００１年建 立，以ＣｏｔＢ为锚定蛋白将破伤风毒素展示在枯草芽胞 量地展示目的蛋白成为首要问题。本文介绍了枯草芽 杆菌芽胞表面，提供了一种新型高效的抗原免疫模式。 胞杆菌芽胞表面展示技术的应用以及如何提高目的外 此后芽胞表面展示系统越来越受到关注，先后建立了 源蛋白的产量。 苏云金芽胞杆菌表面展示系统［４］、炭疽芽胞杆菌表面 １　枯草芽胞杆菌芽胞的结构及形成过程 ［５］ 展示系统 、枯草芽胞杆菌表面展示系统等多种芽胞 表面展示系统。枯草芽胞杆菌表面展示系统作为一种 　　枯草芽胞杆菌处于不利的外界环境中时，会产生 最常见的芽胞表面展示系统，其优势包括：第一，外源 一个椭圆形的休眠细胞称为芽胞。它是枯草芽胞杆菌 ［７］ 目的蛋白在表面展示的过程中无需穿膜过程，因此提 形成的一种内生孢子。１９９２年Ｂｕｌｌ等 将可形成内生 高了外源目的蛋白的展示效率；第二，可展示分子量较 孢子的细菌分为１３个属，包括芽胞杆菌属（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）、 大的外源蛋白；第三，可展示多聚体外源蛋白；第四，芽 羧菌 属 （Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕ