川贝母新资源太白贝母中水溶性成分的含量测定-中国中药杂志.docVIP

川贝母新资源太白贝母中水溶性成分的含量测定 黄林芳1，段宝忠1，王丽芝1，魏大华2，卢其福2 ，陈士林*1 （1. 中国医学科学院 药用植物研究所，北京 100193； 2. 广州潘高寿药业股份有限公司，广州511490） 【摘要】 目的：建立RP-HPLC-DAD 同时测定太白贝母药材中7 种核苷类活性成分（胞苷、尿苷、鸟苷、胸苷、腺苷）及碱基（尿嘧啶、腺嘌呤）含量的方法。方法：采用Zorbax SB-Aq C18 色谱柱（4.6 × 250 mm，5 μm），流动相为甲醇和水，梯度洗脱，流速1 mL·min-1，检测波长260 nm，柱温为25℃。结果：尿嘧啶、胞苷、尿苷、鸟苷、胸苷、腺苷、腺嘌呤的质量分别在0.2~ 37.440，1.09 ~ 65.700，1.02 ~ 61.200，1.07 ~ 64.500，0.81 ~ 48.720，1.07 ~ 64.200，0.43 ~ 25.920 (g·mL-1浓度内呈良好线性关系。平均回收率为9.96％～10.52 %，RSD ≤ 3.80 %。，符合分析要求。结论：太白贝母水溶性成分主要是核苷类成分，所建立方法简单、重复性好，准确可靠，， 【关键词】 太白贝母；水溶性成分；HPLC-DAD；质量控制 太白贝母为百合科贝母属植物太白贝母Fritillaria taipaiensis P.Y.Li的干燥鳞茎为2010年版《中华人民共和国药典》（一部）川贝母项下新收载基原植物。太白贝母商品在民间作为川贝母使用具有悠久的历史[1]，并被《四川省中药材标准》、《甘肃省中药材质量标准》和《宁夏中药材标准》等多省药品标准收载作川贝母使用。笔者在实际调查中发现其植物形态与川贝母Fritillaria cirrhosa D. Don.区别较难把握[2]，且有过渡[3]，肖培根、陈心启等学者也认为包括太白贝母在内的川贝母复合群是川贝母商品“青贝”的主要来源，都可以作为川贝母使用[4, 5]。川贝母F cirrhosa的化学成分主要是生物碱和非生物碱成分[6, 7]，[12, 13]，但太白贝母最近的研究表明，贝母的水溶性成分具有抗炎、抑制血小板凝聚、降压、松弛平滑肌等作用[8-10]，而贝母的抗炎作用能协同治疗呼吸道感染，是贝母止咳化痰的药理学基础[11]，太白贝母在民间传统用法也是用水煎剂，探讨水溶性成分，对研究太白贝母与川贝母的相似性和阐明其药效具有一定的意义。为笔者在前期对川贝母F. cirrhosa成分及太白贝母相关研究的基础上[6, ]，采用HPLC-DAD法测定了太白贝母药材中的水溶性成分，现将研究结果报道如下。 1 仪器、药品与试剂 1.1 Waters 2690 HPLC系统，包括四元梯度泵、在线真空脱气机、自动进样器，恒温柱箱，996 DAD 检测器，Empower 2工作站。Agilent Zorbax SB-Aq C18 色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm，USA），超声波清洗仪（昆山市超声仪器有限公司，KQ-400KDE）、离心机（Sigma，1-14）、电子分析天平（Mettler，AB135-S）。 1.2 核苷类对照品尿嘧啶（Uracil）、胸苷（Thymidine）、腺苷（denosine）和尿苷（Uridine）购于中国药品生物制品检定所；胞苷（Cytidine）购于天津奎青商贸有限公司；鸟苷（uanosine）、腺嘌呤（denine）购于Solarbio公司，对照品纯度经HPLC峰面积归一化法计算大于98%。 1.3 色谱级甲醇、乙腈（Fisher Scientific，Fairlawn New Jersey），水为超纯水，其他试剂均为分析纯。 1.4 5份太白贝母样品采于重庆市，见表 1。经陈士林教授鉴定为太白贝母F. taipaiensis P.Y.Li，凭证标本存放于中国医学科学院药用植物研究所标本馆。药材经烘干后粉碎，过80目筛，备用。 2 方法与结果 2.1 色谱条件 Agilent Zorbax-SB-Aq C18柱（4.6 × 250 mm，5 μm）；流动相为甲醇（A）与水（B）；流速1 mL·min-1；检测波长260 nm；柱温25 ℃；进样量20 μL，见表1。 表 1 流动相梯度洗脱程序 Time / min Methanol / % Water / % 0.0 1 99 13.0 5 95 22.0 10 90 30.0 20 80 40.0 30 70 50.0 40 60 2.2 系统适用性 在2.1色谱条件下检测各相邻色谱峰之间的分离度均大于1.5，拖尾因子在0.95 ~ 1.16之间；理论塔板数均大于11400（USP），对照品及太白贝母药材样品中 7 个核苷类成分基线分离，HPLC色谱图