饲料中补充蜡样芽孢杆菌bacilluscereus生物膜对凡纳滨对虾.pdfVIP

第38 卷 第4 期 渔 业 科 学 进 展 Vol.38, No.4 2 0 1 7 年 8 月 PROGRESS IN FISHERY SCIENCES Aug., 2017 DOI: 10.11758/yykxjz.20160314001 / 饲料中补充蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)生物膜 对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)生长、 抗病力及其肠道微生物组成的影响* 1,2 2 1,2 2① 2,3 刘文亮 许 华 唐 杨 宋晓玲 黄 倢 (1. 上海海洋大学 上海 201306 ；2. 农业部海水养殖病害防治重点实验室 青岛市海水养殖流行病学与 生物安保重点实验室 中国水产科学研究院黄海水产研究所 青岛 266071 ； 3. 青岛海洋科学与技术国家实验室 海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室 青岛 266071) 摘要 为了研究外源补充蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus) 生物膜对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei) 生长、抗病力及对其肠道微生物组成的影响，以基础饲料为空白组，在基础饲料中添加 8 蜡样芽孢杆菌游离态活菌作为游离态组(活菌含量为10 CFU/g) ；在基础饲料中添加蜡样芽孢杆菌活 8 菌生物膜作为生物膜组(活菌含量为10 CFU/g) ；每组8 个平行。在养殖大棚暂养7 d 后，对凡纳滨 对虾进行40 d 的养殖实验。在第17 天进行白斑综合征(White Spot Syndrome Virus ，WSSV)攻毒实 验；第22 天进行副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)攻毒实验。期间在第1、5、10、15 天采样， 称重并测量体长计算生长速率。在第1、5、10、15、20 、25 天采样，并取其肠道内容物提取DNA ， 用16S rDNA 序列V3+V4 区高通量测序方法检测对虾肠道内微生物群落的结构及变化情况。结果 显示，生物膜组和游离态组对虾体重、体长增长速率高于空白组，生物膜组与游离态组对虾体重、 体长差异性不显著，生物膜组和游离态组对虾体重、体长与空白组相比差异性显著。实验中凡纳滨 对虾肠道微生物由变形菌门(Proteobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、放线菌门(Actinobacteria)、厚 壁菌门(Firmicutes) 等组成，其中，变形菌门平均占到总量的 94.0% 。变形菌门中主要以弧菌属 (Vibrio)、发光杆菌属(Photobacterium)、Octadecabacter 等为主，生物膜组、游离态组、空白对照组 弧菌属平均含量分别为34.65%、39.27%、58.00%。在WSSV 攻毒实验中，生物膜组、游离态组、 空白对照组平均累积死亡率分别为80.0%、77.0%、92.0% ，各组差异性不显著(P0.05) 。在副溶血 弧菌攻毒实验中，生物膜组、游离态组、空白对照组平均累积死亡率分别为61.3%、75.0%、77.3% ， 生物膜组与游离态组和空白对照组相比差异性显著(P0.05) 。研究表明，饲料中添加蜡样芽孢杆菌 生物膜和游离态蜡样芽孢杆菌投喂凡纳滨对虾后，可改变对虾肠道的微生物组成，提高凡纳滨对虾 生长速度、增强抗病能力，而且添加蜡样芽孢杆菌生物膜效果最明显。 关键词 蜡样芽孢杆菌；生物膜；凡纳滨对虾；肠道微生物；高通量测序 中图分类号 S945 文献标识码 A 文章编号 2095-9869(2017)04-0087-