烟草柠檬酸合成酶基因的克隆及其光诱导型植物表达载体的构建.pdfVIP

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2017-11-11 发布于天津
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烟草柠檬酸合成酶基因的克隆及其光诱导型植物表达载体的构建.pdf

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第卷第期草业学报１８４１６１－１６７　　　　，　　年月Ｖｏｌ．１８Ｎｏ．４ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ２００９８烟草柠檬酸合成酶基因的克隆及其光诱导型植物表达载体的构建，１２２２２ １ 胡清泉，王奇峰，李昆志，陈丽梅，玉永雄（西南大学动物科技学院，重庆；昆明理工大学生物工程技术研究中心，云南昆明）１．４００７１６２．６５０２２４摘要：紫花苜蓿为多年生优质豆科牧草。我国南方地区酸性土壤分布比较广，铝害比较严重，限制了紫花苜蓿在南方地区的推广利用。提高有机酸合成酶基因的表达活性，增加有机酸的合成与分泌，有利于增强植物的耐铝性。本研究根据中已知的烟草柠檬酸合成酶（，）基因的序列，通过从烟草总ＧｅｎｅｂａｎｋＣｉｔｒａｔｅＳｎｔｈａｓｅ犮狊ＲＴ－ＰＣＲｙ中扩增基因的，亚克隆于载体得到重组载体，对中的插入片断进行核酸序列ＲＮＡ犮狊ｃＤＮＡＴＭＤ１８犮狊ＭＤ１８犮狊ｐｐ分析确认为基因的全长。用光诱导型启动子（，小亚基的启动子）和双元载体构建了犮狊ｃＤＮＡＲｕｂｉｓｃｏｐＰＺＰ２１１犮狊基因的光诱导型植物表达载体ｐＰＺＰ２１１ＰｒｂｃＳ犮狊，为利用基因工程手段提高紫花苜蓿耐铝毒能力，促进其在南方地区推广利用奠定了物质基础。关键词：柠檬酸合成酶基因；光诱导型启动子；植物表达载体；紫花苜蓿；耐铝性中图分类号：；＋文献标识码：文章编号：（）Ｑ９４３．２Ｑ９４６．８１８．６Ａ１００４５７５９２００９０４０１６１０７　　　　  紫花苜蓿（）为多年生豆科牧草，是世界公认的优质饲草。自二十世纪九十年代以来，紫花犕犲犱犻犮犪狅狊犪狋犻狏犪　犵苜蓿在全球的种植面积已经超过万２。在我国，紫花苜蓿主要生产在北方地区。近年来，由于草食畜牧３５００ｈｍ［］１业的快速发展，我国南方的部分地区也引进了紫花苜蓿，并开始推广利用。但是，我国南方地区的土壤多