应用RTPCR和病毒学方法诊断山东省鸡新城疫感染的比较研究.pdfVIP

大疫病。． 四、重组NDV活载体疫苗作为人类H5禽流感 A型流感病毒血凝素(HA)是诱导保护性抗体大流行疫苗前瞻性探索研究 免疫反应的最主要免疫原。我们相继构建了表达A／ 。新城疫病毒(NDV)为单股负链RNA病毒疫 Goose／Guangdong／96／1／H5N1(GD／96)分离株野苗，在人类可发生一过性复制，在灵长实验动物模型 生型HA基因和裂解位点碱性氨基酸缺失突变型 进行系统评估结果显示，重组NDV是防制重大烈 HA基因、A／BHG／QH／2005／3／H5N1(QH／05)分 性紧急传染病极有希望的安全、有效活病毒疫苗载 离株野生型和裂解位点碱性氨基酸缺失突变型HA 体。 基因的重组NDVLaSota疫苗株，分别为rLaSota 我们采用已经构建的表达H5亚型AIV分离 —HAwt(GD)、rLaSota—HAmut(GD)、rLaSota— HAwt(QH)和rLaSota—HAmut(QH)；所有重组 NDV均保持野生型LaSota疫苗株的高滴度鸡胚生 鼠动物模型，进行了安全性和免疫保护效果的评估。 长和低致病性特性，高代次连续传代仍然保持生物 结果表明，表达野生型H5亚型AIV分离株HA基 学特性和外源重组HA基因的稳定表达不变。 因的重组NDV对小鼠具有高度的生物安全性。以 重组病毒rLaSota～HAmut(GD)和rLaSota— HAmut(QH)分别按106EID。。常规剂量一次免疫7 目龄SPF雏鸡，分别诱导显著而持久的NDV和H5 射途径接种小鼠，两次免疫后可诱导显著的NDV 亚型AIV特异保护性HI抗体反应；一次免疫3周和H5亚型AIV同特异HI抗体和中和抗体反应} 后，免疫雏鸡对新城疫强毒致死攻击均100％完全 所有免疫小鼠对重组HA抗原基因同源H5亚型高 保护；对重组HA基因同源和异源H5亚型高致病致病力AIV及抗原偏移异源H5亚型高致病力 力AIV的致死攻击分别形成100％完全保护，攻毒 AIV的致死攻击均为100％完全保护，并且完全阻 后不发病、不死亡且喉头及泄殖腔排毒检测阴性。在 止攻击病毒在小鼠体内的复制。实验结果证明了重 此基础上，对H5禽流感重组新城疫病毒活载体疫 组NDV活载体疫苗防治H5亚型高致病力禽流感 苗进行了有效剂量、免疫途径及商品鸡免疫程序的 在哺乳动物的有效性，有望作为防治人类H5亚型 系统研究。试验结果表明，重组新城疫病毒可以作为 高致病力禽流感的新型候选疫苗。 安全有效、成本低廉的基因工程二联活疫苗，用于家 禽H5亚型高致病力禽流感及新城疫的免疫防制。 应用RT--PCR和病毒学方法诊断山东省 鸡新城疫感染的比较研究 黄艳艳1，胡北侠1，张秀美1#，刘玉庆1，卢新存2，李俊1 (1．山东省农业科学院畜牧兽医研究所，山东济南2．山东省日照进出口检验检疫局，山东日照) [摘 要] 分别应用病毒分离和区分新城疫强弱毒株的RT--PCR技术。对山东各地疑似鸡新城疫感染的25份病料进 行了实验室诊断。结果从18份病料中既扩增到了新城疫强毒基因，也分离到了新城疫病毒；3份病料未分离到病毒，仅扩增到 了新城疫强毒基因}4份病料分离到了新城疫病毒，但未检测到相关基因。研究表明，将RT--PCR和病毒分离鉴定两种方法 相结合，可更好的满足快速、灵敏、准确的新城疫诊断要求。 [关键词]新城疫；诊断)RT--PCR；病毒分离 作者简介：黄艳艳(1977～)，女，山东省泰安市人，助理研究员，预防兽医学硕士。现在山东省农科院从事科研工作． #张秀美为通讯作者 一98— 新城疫(ND)又称亚洲鸡瘟，是由禽副粘病毒 I型的新城疫病毒(NDV)引起的一种禽类的高度疫病毒弱毒引物，扩