人肝癌细胞系74027721及癌旁肝细胞7701在重组-河北医科大学.pdfVIP

第35卷第5期 河 北 医 科 大 学 学 报 Vol.35 No.5 ·546 · 2014年5月 JOURNAL OF HEBEI MEDICAL UNIVERSITY May 2014 ·论 著 · 人肝癌细胞系7402、7721及癌旁肝细胞7701在 重组腺病毒 -胸苷激酶/ 更昔洛韦系统作用前后 差异蛋白检测及 Ck18表达 1 2 1 1 3 1* 朱艳培 ，李 宁 ，陶 莹 ，王 珏 ，于 玮 ，戴 洁 （1.首都医科大学临床病理中心，北京100069；2.首都医科大学附属北京佑安医院肝胆外科，北京100069； 3.首都医科大学附属北京安贞医院病理科，北京100029 【摘要】 目的 检测重组腺病毒-胸苷激酶/ 更昔洛韦（adenovirus-thymidine kinase/ ancyclovir，ADV-TK/ GCV 系统作用前后人肝癌细胞株7402、7721及癌旁肝细胞7701差异蛋白表达，进一步阐明ADV-TK/ GCV 自杀基因系 统作用机制。方法 利用肽质量指纹图谱和双向电泳分析法检测ADV-TK/ GCV系统对人肝癌细胞7402、7721及癌 旁肝细胞7701作用前后的差异蛋白；常规病理学技术苏木精伊红染色、电子显微镜技术观察作用前后细胞病理形 态学改变；免疫细胞化学方法检测细胞角蛋白 18（cytokeratin 18，CK18）的表达部位、分布范围及量的变化。结果 7721及7701对ADV-TK/ GCV系统作用不敏感，人肝癌细胞7402经自杀基因药物作用后，多种蛋白表达呈现出差 7402 细胞的CK18表达上调明显。 异性，差异点主要表现为与物质能量代谢相关的酶类及与细胞骨架相关的蛋白， 加药组7402 细胞死亡明显，残留细胞体积变大，胞浆疏松，空泡变性。电镜观察显示加药组细胞器水肿，变化明 显，微丝增多，且多分布于核周围，凋亡现象明显。7402免疫细胞化学染色显示加药组 CK18 的表达增强且向核周 聚集。结论 ADV-TK/ GCV 自杀基因系统作用后，敏感株7402蛋白表达具有差异性，其中CK18表达显著上调且出 现分布改变，并引起细胞形态学的变化。 【关键词】 肝肿瘤；差异蛋白；角蛋白质类 doi：10.3969/ j.issn.1007-3205.2014.05.017 【中图分类号】 R735.7 【文献标志码】 A 【文章编号】 1007-3205（2014 05-0546-05 DETECTION OF DIFFERENCE PROTEIN AND OBSERVATION OF PATHOMORPHISM ON HUMAN HEPATOMACARCINOMA CELL LINE7402，7721 AND ADJACENT LIVER CELL7701 BEFORE AND AFTER ADV-Tk/ GCV TREATMENT 1 2 1 1 3 1* ZHU Yanpei ，LI Nin ，TAO Yin ，WANGJue ，YU Wei ，DAI Jie （1.Centerfor Clinical Pathology，CapitalMedical University，Beijing 100069，China；2.Department of Hepatobiliary S rgery，Beijing Yo ’anHo