二兰州大学分子生物学染色体与DNA(下).pptVIP

第二章 染色体与DNA 可移位遗传因子的发现Ⅱ 可移位遗传因子的发现Ⅲ 可移位遗传因子的发现Ⅳ 可移位遗传因子的发现Ⅴ The Nobel Prize in Physiology or Medicine 1983 转座子 典型转座子结构模式图 转座的两种方式 在转座子插入处产生短的同向重复序列 直接转座和复制转座 直接转座和复制转座 原核生物中的转座子 某些细菌转座子（IS）的特征 TnA转座子家族的结构 含有同向IS的复合转座子 含有反向IS的复合转座子 自主转座子与非自主转座子 自主转座子与非自主转座子 真核生物中的转座子 玉米转座子 Ac 以及衍生的几种 Ds 结构 Ds 因子的类型 Ac和Ds因子两端序列的作用 寻找转座子的方法 1. 玉米中的控制因子 玉米转座子Spm以及几个非自主衍生物的结构 2. 果蝇中的转座子 果蝇Copia转座子和酵母Ty转座子的结构 果蝇的P因子 P因子转座导致杂交后代不育 P因子转座导致杂交后代不育 LTR逆转录转座子 逆转录病毒 逆转录病毒生活周期模式图 原病毒 DNA 逆转录病毒的逆转录过程 逆转录病毒的逆转录过程 逆转录病毒的基因 逆转录病毒原病毒DNA的结构及转录表达过程 LTR－逆转录转座子 LTR－逆转录转座子的结构模式 逆转录转座子LTR的性质 无LTR－逆转录转座子 LINES家族 非病毒超家族 人基因组中各种转座子的比例 无LTR∣逆转录转座子的转座机理 转座子转座与基因表达 Ac-Ds 转座使玉米籽粒颜色产生变异 转座子转座与基因表达 转座频率 七、DNA重组 遗传重组的意义 遗传重组的意义 DNA重组的类型 2. 同源重组 同源重组对同源序列的要求 减数分裂中的同源重组 细菌中同源重组的意义 细菌中同源重组的意义 Holliday模型 Holliday模型 Holliday模型的缺点 DNA双链断裂启动同源重组 DNA双链断裂启动同源重组 DNA双链断裂启动同源重组 同源重组时的分支移动 Holliday中间体的电镜照片 重组需要多种酶及其它蛋白质的作用 RecBCD酶的作用 RecBCD酶的作用 Chi位点与重组频率的关系 RecA蛋白的作用 RecA蛋白与单链DNA组成核蛋白纤丝 RecA介导的DNA链交换模型 体外RecA促进的链交换反应 体外RecA促进的链交换反应 同源重组中其它酶的作用 转座子间同源重组导致染色体畸变 3. 位点特异重组 位点特异重组的机制 位点特异重组的机制 另一种位点特异重组机制 位点特异重组的结果 λ噬菌体整合到大肠杆菌染色体上 λ噬菌体整合到大肠杆菌染色体的特异位点处 位点特异重组在DNA复制中的作用 位点特异重组在DNA复制中的作用 细菌位点特异重组对基因表达的调控 细菌位点特异重组对基因表达的调控 Robin Holliday于1964年提出一个解释同源重组的模型，在这个模型中，①两个同源染色体DNA排列整齐；②一个DNA的一条链断裂并与另一个DNA对应的链连接，形成连接分子，称为Holliday中间体；③通过分支移动产生异源双链DNA；④holliday中间体切开并修复，形成两个双链重组体。 Holliday模型能够较好地解释同源重组现象。但该模型认为进行重组的两个DNA分子在开始时需要的对应链的相同位置上发生断裂，这是很难设想的。现在认为，同源分子中的一个分子需要双链断裂才能启动与另一个分子之间发生重组。同源重组是减数分裂时同源染色体联会的原因，而不是结果。 这个模型有四个关键特征。①同源染色体对齐。②一个DNA分子的双链断裂被核酸外切酶扩大，在断裂端产生3’突出的单链（图中步骤1）。③暴露的3’末端侵入完整的双链DNA，然后分支移动（branch migration）和复制产生一对交换结构，称为Holliday连结体（Holliday junctions）（图中步骤2到4）。④两个交换断裂产生两个完整的重组产物（图中步骤5）。 A Holliday intermediate formed between two bacterial plasmids in vivo, as seen with the electron microscope. The intermediates are named for Robin Holliday, who first proposed their existence in 1964. 从原核生物和真核生物中已经分离出了促进同源重组各步骤的酶。在大肠杆菌中，recB、recC和recD基因编码RecBCD酶，它具有解旋酶和核酸酶两种活性。RecA蛋白促进同源重组所有的重要步骤：两个DNA配对，形成Holliday中间体，分支移动。Ru