重组植酸酶appam8的异源表达与性质比较-应用与环境生物学报.pdfVIP

重组植酸酶appam8的异源表达与性质比较-应用与环境生物学报.pdf

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2015-02-25 DOI: 10.3724/SP.J.1145.2014.07033 / Chin J Appl Environ Biol 2015 21 ( 1 ) : 51-56 应用与环境生物学报 , * 重组植酸酶appAM8的异源表达与性质比较 宋玛丽 王 茜 杜 军 惠德权 梁爱华** 山西大学生物技术研究所,化学生物学与分子工程教育部重点实验室 太原 030006 摘 要 为比较 在不同宿主中表 达的大 肠杆菌植酸 酶 突 变体 appAM8 的性 质,将appAM8基因分别在大 肠杆菌 BL21(DE3) GS115 . 1 和毕赤酵母 中进行表达,对纯化后的植酸酶进行酶学性质分析与比较 结果显示:( )在大肠杆菌 appAM8 E-appAM8 appAM8 P-appAM8 pH 4.5 65 中表达的 ( )和酵母中表达的 ( )的最适 值均为 ,最适反应温度均为 ℃, appA pH appA 5 2 SDSE- appAM8 M 与野生型的 的最适 无明显区别,比 的最适温度高了 ℃;( )经 检测, 分子量( r ) 47 × 103 P- appAM8 53 × 103 (3 60-80 大小为 ,而 为 左右,由于在酵母中的糖基化修饰电泳显示为两条带; )在 ℃之间, E-appAM8 70 15 min E-appAM8 4% P-appAM8 50% 的热稳定性性明显下降,而且在 ℃处理 后, 残余活性仅为 ,而 仍保留 的 . 4 E -appAM8 K = 0.245 mmol/L V 残余活性,表明酵母表达的植酸酶经过糖基化修饰后提高了酶的热稳定性 ()

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