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猫松果腺提取物MSTQW对免疫缺陷
猫松果腺提取物(MSTQW)
张世华 陈春林
(重庆市养猪科学研究院 重庆·荣昌 402460)
摘 要:连续注射猫松果腺提取物(MSTQW)MSTQW对免疫器官肝、脾、胸腺的增重作用明显(P0.01),能增强小鼠抗疲劳能力(P0.01);淋巴细胞比例升高(P0.01),噬酸性白细胞、噬中性白细胞比例降低(P0.01),巨噬细胞吞噬功能显著增强(P0.01),T淋巴细胞形成率、半数溶血素值上升(P0.01)。提示出MSTQW对免疫缺陷小鼠的整体免疫功能具有显著的恢复作用。
关键词:松果腺 免疫缺陷小鼠 免疫功能 影响
松果腺(Pineal gland,PND)是一个多功能器官,又称为神经内分泌传感器。褪黑素(Melatonin,MT、MLT)是松果腺分泌的一种重要激素,参与神经—内分泌—免疫系统的调控,除了参与性腺、昼夜节律、肾上腺、诱导睡眠等功能调节外,还具有免疫调节,抗氧化、抗衰老及抗肿瘤等功能;能从不同层次对免疫应答发挥上调作用[1、2、3]。对PND、MT免疫调节作用的深入探讨,有助于对免疫过程的认识和临床应用价值的了解,为此,我们采用猫的松果腺提取物,研究其对免疫缺陷型小鼠免疫功能的影响。现将实验结果报道如下:
1 材料与方法
1.1 试验动物 昆明系小白鼠,♀♂兼用,体重18.0—22.0g,由四川泸州医学院动物实验中心提供健康猫40~70日龄1.2 药品与试剂 氢化可的松注射液(HC),西南药业股份有限公司Alsevers溶液,无钙镁Hanks溶液,淋巴细胞分层液,1%新鲜鸡红细胞悬液,1%兔红细胞悬液,10%豚鼠新鲜血清,0.5%淀粉生理盐水牛血清成都生物药械厂。
1. 试验方法
1.3.1 猫松果腺提取物(MSTQW)的制备 健康猫,避光4h后宰杀,无菌取下松果腺,冷冻3h,加灭菌生理盐水、甲醇(2:1)充分溶解,氯仿脱脂,上层液离心10min,得粗品,40oC避光蒸馏,0.01g/ml的溶液,置4oC冰箱备用。
1..2 动物分组与给药方法 试验设正常对照模型组和免疫缺陷模型组。
1.3.2.1 正常对照模型组的建立[6、7] I组:按0.4ml/只剂量,小白鼠d,连续10d;II组:按0.4ml/只剂量,小白鼠6d后,腹腔注射0.5%淀粉生理盐水4d,次1d;III组:按0.4ml/只剂量,小白鼠6d后,腹腔注射1%兔红细胞(HRBC)4d,次1d。
1.3.2.2 免疫缺陷模型组的建立[6、7] IV组:按0.4ml/只剂量,小白鼠HC,3d后,生理盐水7d,次1d;V组:按0.4ml/只剂量,小白鼠HC 3d、生理盐水3d,腹腔注射0.5%淀粉生理盐水4d,次1d;VI组:按0.4ml/只剂量,小白鼠HC 3d、生理盐水3d,腹腔注射1%兔红细胞(HRBC)4d,次1d;VII组:按0.4ml/只剂量,小白鼠HC 3d后,MSTQW 7d,次1d;VIII组:按0.4ml/只剂量,小白鼠HC 3d、MSTQW 7d后,腹腔注射0.5%淀粉生理盐水4d,次1d;XI组:小白鼠HC 3d、MSTQW 7d后,腹腔注射1%兔红细胞(HRBC)4d,次1d。
1.3.3 观察指标及方法
1.3.3.1 肝、脾、胸腺指数测定 各组取小鼠10只,称重(P),眼球采血肝素抗凝,备用;小鼠,分别取肝、脾、胸腺,称重(Q),脏器指数=Q/P。
1..3.2 抗疲劳能力的测定 随机各取小鼠5只,分别放于玻璃缸中(盛水约2/3),分别计时,以其挣扎时间长短来其抗疲劳能力。
1..3.3 白细胞分类记数:参照文献外周血白细胞1.3.3.4 巨噬细胞吞噬率及吞噬指数测定 Ⅱ、V、Ⅷ组小鼠在采血前0.5h腹腔注射1%鸡红细胞悬液0.4ml。颈椎脱臼处死小鼠,无菌取腹液涂片,瑞氏染色,镜检。每片计数200个巨噬细胞(macraphage,MΨ)。
吞噬率=(吞噬鸡红细胞的M/MΨ总数)×100%
吞噬指数=(被吞噬的鸡红细胞数/M100%。
1..3.5 E-玫瑰花环形成率测定 Ⅰ、Ⅳ、Ⅶ组小鼠,anks液洗涤2~3次,测定EA%。1.3.3.6 外周血溶血素测定 %鸡红细胞悬液0.2ml进行免疫,免疫后第7d,小白鼠眼眶采血,分离血清,测定溶血素含量。
1.3.4 数据处理 以上各组数据均采用t检验。
2、结果
2.1 对肝、脾、胸腺的影响:HC对小鼠肝、脾、胸腺均具有P0.01),致使脏器肿大明显;MSTQW使肝、脾体比P0.01),但与正常对照组相比,差异不显著性(P>0.05)。(结果见表1)
表1 肝、脾、胸腺的(n=10,X±S )
组别 药物 剂量(ml) 脏/体(1
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