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动物细胞工程-讲座
仙台病毒 (1)小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合? (2)制备过程中应用哪些细胞 工程技术手段? (3)在整个制备的过程中要经过几次筛选? 单克隆抗体的应用 应用: 疾病的诊断、治疗和预防。 优点:特异性强、灵敏度高。 实例: 1、各种癌症、肝炎病毒、SARS病毒、细菌 及血吸虫等数百种疾病的诊断; 2、在疾病治疗方面,单克隆抗体犹如人体卫士,能识别“自己”与“异己”,一旦发现 致病因素便与之结合将其杀死。 3、若在单抗上带上抗癌药物制成“生物导弹”,将药物定向带到癌细胞所在部位,既消灭了癌细胞又不会伤害健康细胞。 世界上第一只克隆羊“多莉”的培育过程如图所示,请据图回答: 培养液 种类:液体培养基 成分:葡萄糖、氨基酸、无机盐、 维生素和动物血清等 动物细胞培养 胚胎成幼龄动物的组织器官(细胞来源) 原代培养: 传代培养: 细胞株: 细胞系: 应用: 1、生产有价值的蛋白质制品,(如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体、动物激素) 2、检测有毒物质 3、用于某些器官移植 * 动物细胞工程 动物细胞工程 单克隆抗体养 细胞融合 细胞培养 胚胎移植 核 移 植 动物细胞培养 (1)动物细胞培养液成分 ? (2)动物细胞培养过程? (3)区别: 原代培养与传代培养 细胞株与细胞系 (4)动物细胞培养的应用? 有何同?不同? 动物细胞融合 紫外线 丧失感染活性 不感染细胞 保留融合活性 诱导细胞融合 物理法 化学法 生物法 1、单克隆抗体? 单: 克隆: 抗体: 单个细胞? 无性繁殖 抗原→B细胞→抗体 特异性结合 单克隆抗体 2、米尔斯坦和柯勒的实验方案 B淋巴细胞能产生抗体,骨髓瘤细胞能无限增殖,杂交瘤细胞既能产生抗体又能无限增殖。 实验目的: 实验原理: 实验材料:小白鼠 实验器材:培养皿、针筒等等。 实验过程:? 制备单克隆抗体 单克隆抗体制备过程 思考: 细胞的同源性越近,融合形成的杂种细胞越易成活 细胞融合技术、细胞培养技术 Ⅰ筛选得到杂交瘤细胞,Ⅱ筛选先在多孔培养板上,在每孔只有一个杂交瘤细胞下培养筛选出特异抗体的细胞群 一、动物细胞培养 1、过程 2、应用: 细胞系 动物胚胎 幼龄动物器官 细胞悬 浮液 10代 细胞 50代 细胞 细胞株 原代培养 传代培养 病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体的生产,制皮肤细胞,检测有毒物质的毒性 3、植物组织培养和动物组织培养的比较 动 物 植 物 培养目的 结果 培养基 原理 比较项目 细胞全能性 细胞增殖 固体 营养物质 植物激素 液体 营养物质 动物血清 培养成植株 培养成 细胞株 细胞系 快速繁殖 培养无病毒植株 获得细胞产品、细胞 二、动物细胞的融合 不同种类的动物细胞之间融合 人与动物细胞之间融合 植物细胞杂交与动物细胞杂交的比较 动物 植物 用途 诱导手段 方法 原理 比较 项目 细胞膜 流动性 去壁 原生质融合 细胞分散 细胞融合 物理 化学 物理 化学 生物 克服远缘杂交不亲合 制备单克隆抗体 三、单克隆抗体 1、制备过程 2、应用 杂交瘤细胞 效应B细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合 特定培养基筛选 灭活病毒 体外培养 体内培育 疾病的治疗、预防、单克隆抗体诊断盒诊断疾病 乙 甲 a b c d e f (1)图中的甲为苏格兰绵羊,乙为多莉羊。那么,a和b是通过_______分裂形成的,其DNA含量是体细胞的 _______ ;c肯定是__ 细胞,乙的遗传性状与提供 ___________的绵羊 一致. 减数 一半 体 细胞核 乙 甲 a b c d e f (2)产生 甲和乙的过程分别是—————和———— (3)在形成乙是的过程中,需要将d的细胞核取出,将c细胞核移入d细胞内,此技术叫———。所需的受体细胞大多采用动物卵细胞的原因是————————————————————————(4)绵羊的白色对黑色为显色。若甲是白色绵羊,要判断它是否纯合体,选用与它交配的绵羊最好是————------------------------- 有性生殖 克隆 核移植 卵细胞大,易于操作;卵细胞具有继续分化的潜能。 黑毛 乙 甲 a b c d e f (5)在产生多莉羊时,需将e细胞形成的早期胚胎移入另一头母羊(f)子宫里,这种技术在细胞工程中叫———————— (6)继植物组织培养后,克隆绵羊的培育成功,证明动物细胞也有————— (7)在繁殖多莉羊的过程中,是否遵循孟德尔遗传规律?多莉羊的性状与d羊、c羊及f羊的关系是什么?—————————————— 胚胎移植 全能性
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