肽核酸在分子生物学技术中的应用.PDFVIP

中国生物工程杂志　ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１３，３３（１）：９０９４ 檪檪檪檪檪檪檪檪殏 檪 殏 檪 檪 综　　述 殏檪檪檪檪檪檪檪檪檪殏 肽核酸在分子生物学技术中的应用  王建华 　郭泽琴 （重庆大学生物工程学院　重庆　４０００４４） 摘要　肽核酸（ＰＮＡ）作为一种人工合成的核酸类似物，以中性的肽链酰胺２氨基乙基甘氨酸键 取代了ＤＮＡ中的戊糖磷酸二酯键骨架，其余部分与ＤＮＡ相同。ＰＮＡ可通过ＷａｔｓｏｎＣｒｉｃｋ碱基配 对的形式识别并结合ＤＮＡ或ＲＮＡ序列，形成稳定的双螺旋结构。与传统的ＤＮＡ或 ＲＮＡ相比， ＰＮＡ具有生物学稳定性高、杂交特异性强、杂合体的稳定性高和杂交速度快等明显优点，使 ＰＮＡ 具有良好的物理化学性质和生物学特性，在检测目的核酸序列中单碱基突变、ＰＣＲ基因分子诊断 与检测、荧光原位杂交定量分析、基因芯片和生物传感器技术等调控水平和临床应用上有自己的 特点。简要综述了近年来肽核酸在上述分子生物学技术中的运用以及应用前景的展望。 关键词　肽核酸　杂交探针　基因检测 中图分类号　Ｑ７５ 　　肽核酸（ｐｅｐｔｉｄｅｎｕｃｌｅｉｃａｃｉｄ；ＰＮＡ）是一种人工合 成的ＤＮＡ或ＲＮＡ类似的物，其骨架由重复排列的Ｎ２ （氨乙基）甘氨酸（Ｎ（２ａｍｉｎｏｅｔｈｙｌ）ｇｌｙｃｉｎｅ）单位构 成，碱基和骨架间以亚甲羰键相连。由于其没有如 ＤＮＡ或ＲＮＡ上的磷酸基团，因此显电中性，与ＤＮＡ和 ＲＮＡ间无电性排斥，碱基配对特异性强，在结合 ＤＮＡ 和ＲＮＡ时可形成稳定的复合物（如图１），热稳定性高， 图１　ＰＮＡ与ＤＮＡ互补形成的复合物结构图 加之ＰＮＡ也不易被蛋白酶或者核酸酶水解，因此，ＰＮＡ Ｆｉｇ．１　Ｔｈｅｓｔｒｕｃｔｕｒｅｏｆｓｔａｂｌｅｈｙｄｒｉｄｃｏｍｐｌｅｘｅ 在生物学研究和临床医学领域有着广阔的应用前景。 ｆｒｏｍＰＮＡｂｉｎｄｉｎｇｔｏｃｏｍｐｌｅｍｅｎｔｒｙＤＮＡ 本文拟对ＰＮＡ在分子生物学技术中的运用及展望进行 ［１］ 简述。 ＰＮＡ骨架Ｎ氨基乙基甘酰胺基构象的约束 ，无手性 对映体。 １　肽核酸的性质 １．２　杂交特性 １．１　理化性质 　　ＰＮＡ与靶序列的结合有两种方式，即反向平行互 补结合和正向平行互补结合。以反向平行结合形成的 　　（１）ＰＮＡ非磷酸骨架呈中性的特性使得其与阴性 复合物热稳定性高。与其他反义试剂相比，ＰＮＡ具有 ＤＮＡ或ＲＮＡ之间无静电排斥，大大提高了结合的稳定 ［２］ 较高的热稳定性 ，在适当的盐度下，几种核酸杂交热 性；（２）ＰＮＡ可与生物素、荧光素等分子结合形成标记 稳定性顺序为：ＤＮＡ／ＤＮＡ ＜ＰＮＡ／ＤＮＡ ＜ＰＮＡ／ＲＮＡ 分子，也可与ＤＮＡ、多肽等结合形成嵌合分子；（３）由于 ［３］；ＰＮＡ与核酸的结合具有序列特异性，对互补 ＤＮＡ 收稿日期：２０１２０８０２　　修回日期：２０１２０９２０ 错配的