基因工程及其应用定稿.pptVIP

基因工程:又叫DNA重组技术，通俗的说就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。 限制性核酸内切酶（EcoRⅠ）作用过程 DNA连接酶的作用过程 * 天地与我同生 万物为我所用 天地与我同生 万物为我所用 谁能告诉我这些是什么？ ??????????????????????????????????????????????????? ??????????????????????????????????????????????????? ??????????????????????????????????????????????????? ??????????????????????????????????????????????????? 乳汁中含有人生长激素的转基因牛(阿根廷) 转入人基因具有特殊用途的转基因猪 原 理： 操作水平： 结 果： 基因重组 DNA分子水平 定向地改造生物的遗传性状，获得人类所需要生物类型或生物产品。 操作对象： 基因 1、基因工程的 指“ 限制性核酸内切酶 ”简称限制酶 主要来源于原核生物中 识别某种特定的核苷酸序列,并在DNA每条链上的特定部位切割DNA分子 已发现的有4000多种 种类: 来源: 功能: “ ” 作用部位： 磷酸二酯键 磷酸二酯键 点击播放 什么叫黏性末端？ 当限制酶从识别序列的中心轴线两侧切开时，产生的是带有未配对碱基切口的DNA片段，这样的切口叫黏性末端。 什么叫平末端？ 当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，切开的DNA两条单链的切口，是平整的，这样的切口叫平末端。 　①不同生物的DNA被同一种限制酶切割形成的几个片段是否具有相同的末端？ 思考: ②不同的限制酶切割同种生物的DNA形成的几个片段是否具有相同的末端？ 酶1识别序列和切割的位点是 ----G GATCC---- 酶2的识别序列和切割的位点是---- GATC----请写出这两种酶切割形成黏性末端的作用过程 2、基因工程的 “DNA连接酶” “ ” 作用： 将互补配对的两个末端连接起来，使之成为一个完整的DNA分子 点击播放 质粒主要是存在于细菌细胞质中独立于染色体而自主复制的环状双链DNA分子。 3、基因的运输工具—载体 常用的载体： 质粒、 λ噬菌体的衍生物、动植物病毒。 议一议 2、作为载体，若没有切割位点将 怎样？ 3、携带目的基因的载体是否进入了受体细胞，如何察觉？ 4、假如目的基因导入受体细胞后不能复制，将怎样？ 1、从化学组成来看，载体应含有什么成分？ 双链DNA 不能与外源DNA连接 载体上应有标记基因 可能造成基因丢失 载体(carrying)应该具有什么特点? 3、基因的载体 条 件 ①能够在宿主细胞中复制 并稳定地保存 ②具有一至多个限制酶切割位点 ③具有标记基因 ④对受体细胞无害、易分离 目的基因的提取 基因表达载体的构建 将目的基因导入受体细胞 目的基因的检测与鉴定 将具有上述碱基序列的DNA片段分别用剪刀剪切（模拟EcoRⅠ）然后后用胶布粘贴起来（模拟DNA连接酶））组建成重组DNA分子 重组DNA分子的模拟操作 ----ATAGCATGCTATCCATGAATTCGGCATAC---- ----TATCGTACGATAGGTACTTAAGCCGTATG---- ----TCCTAGAATTCTCGGTATGAATTCCATAC---- ----AGGATCTTAAGAGCCATACTTAAGGTATG---- 1 2 基因工程的操作工具 1.基因的剪刀 ——限制性核酸内切酶 2.基因的针线 ——ＤＮＡ连接酶 3.基因的运输工具 ——载体 基因工程的操作步骤 1.目的基因的提取 2. 基因表达载体的构建 3.将目的基因导入受体细胞 4.目的基因的检测与鉴定 基因工程 * * *