芒果生长素反应因子类蛋白的cdna克隆和表达-中国科技论文在线.pdfVIP

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2018-08-19 发布于天津
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芒果生长素反应因子类蛋白的cdna克隆和表达-中国科技论文在线

20 卷 1 期生　物　工　程　学　报 Vol. 20 　No. 1 2004 年 1 月 Chinese Journal of Biotechnology January 　2004 芒果生长素反应因子类蛋白的 cDNA 克隆和表达 1 ,2 1 1 1 肖洁凝　黄学林　黄　霞　李筱菊 1 ( 中山大学生命科学学院基因工程教育部重点实验室, 广州　510275) 2 (广州大学生物与化学工程学院生物系 ,广州　510400) 摘　要　通过 SSH 法获得了一个与不定根形成相关的差异表达的 cDNA 片段 ,其推导的氨基酸序列与拟南芥的生 ( ) 长素反应因子 ARF 类蛋白具有较大的同源性 ,因此将它命名为 MiARF 。用所设计的基因特异引物进行3′RACE 扩 ( ) ( ) ( ) 增获得包含完整读码框架 ORF 的 MiARF 1 GenBank 登录号为 AY255705 和 MiARF2 GenBank 登录号为 AY300808 。 ( ) ( ) MiARF 1 全长为 3272bp ,其中 ,ORF 含 2523bp ,5′非翻译区 5′UTR 含 285bp , 3′非翻译区 3′UTR 含 464bp 。由该序列 ( ) ( ) 所推导的氨基酸序列与拟南芥ARF2 BAB10162 的 ID 值为 64 % , E 值为 0 ,在 DNA 结合区域 DBD 、III 和 IV 区域的同源性更高 ,ID 值均大于 80 % 。MiARF2 cDNA 全长为 1474bp ,其中 ORF 含 981bp ,5′非翻译区含285bp , 3′非翻译区含 208bp , 由该序列所推导的氨基酸序列与拟南芥ARF2 (BAB10162) 的 ID 值为 84 % , E 值为 e - 151 。MiARF2 仅具有 DBD 保守区并与 MiARF1 的基本相同 ,但缺乏 III 和 IV 区域。Virtural Northern 杂交表明 : MiARF2 在生根的组织中表达水平高 , 而在非生根的组织中未见表达 ; MiARF 1 在生根及非生根的组织中均有表达。 ( ) ( ) 关键词　芒果 Mangifera indica L. 子叶 , 不定根形成 , 生长素反应因子基因 ARF , cDNA 克隆 ( ) 中图分类号　Q943 　　文献标识码　A 　　文章编号 2004