天净沙系列柱式动物线粒体dnacolumnanimalmtdnaout.pdfVIP

天 CAT#:80803-50 净 常温运输及保存 沙 系 列 柱式动物线粒体DNAOUT Column Animal mtDNAOUT 使用手册V 1.0 北京天恩泽基因科技有限公司 北京市海淀区上地信息路26 号北京市留学人员海淀创业园中关村创业大厦506 网址： ；电话：400-6765278；电邮：order@ 产品及特点 线粒体DNA （mtDNA）是进行分子进化研究和母性遗传研究的重要材料， 但传统的两步式mtDNA 提取方法是先温和裂解细胞，分离线粒体，然后再从 线粒体中提取 mtDNA。此方法中的温和裂解细胞的条件十分难以控制，需要 针对不同组织材料单独进行优化。本方法克服了上述缺点，具有下列优点： 1. 不需要单独纯化线粒体，柱式法纯化，操作简单快捷。 2. 得到的mtDNA 可以直接用于PCR 和酶切。 7 3. 每 10 个动物细胞一般能得到 100ng左右的mtDNA ，每克组织一般能得 到3-5 ug mtDNA。 4. 注意：本产品只适合于动物材料，不适合于植物材料，因为植物线粒体DNA 一般都十分巨大，非常难提。 规格及成分 成 份 编 号 50 次包装 溶液A 80803A 13 mL 溶液B 80803B 13 mL 溶液C 80803C 18 mL 离心吸附柱 60911 50 套 通用洗柱液 60408 50 mL DNA 洗脱液2.0 111205 10 mL 使用手册 80803sc 1 份 运输及保存 常温运输，短期可以在室温放置；长期保存最好放4℃。 自备试剂 无 使用方法 一：培养细胞预处理 7 1. 用自备的0.25%胰酶消化液处理约 10 个培养细胞，离心收集后弃上清。 2. 用 PBS 或 TBS 等缓冲液洗涤细胞两次，离心得到的细胞沉淀直接用于 mtDNA 提取。 二：组织细胞预处理 3. 用剪刀将 1g 新鲜的动物组织剪碎 （芝麻大小最好），转移到 1.5mL 塑料 离心管中，用于mtDNA 提取。注意：最好不要使用冻存的动物组织，因 为冻凝过程中形成的冰晶会将线粒体刺破，使其 DNA 释放出来被胞浆中 的DNA 酶降解，影响回收率。 三：血液预处理 4. 将3-5 mL 抗凝外周血静置30 分钟或低速离心5 分钟，取白细胞层。 5. 用自备PBS 洗涤白细胞两次，得到