小干扰rna沉默脂肪酸合酶基因对人肝细胞株-国家心血管病中心.pdfVIP

小干扰rna沉默脂肪酸合酶基因对人肝细胞株-国家心血管病中心.pdf

  1. 1、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。。
  2. 2、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载
  3. 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
  4. 4、该文档为VIP文档,如果想要下载,成为VIP会员后,下载免费。
  5. 5、成为VIP后,下载本文档将扣除1次下载权益。下载后,不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们
  6. 6、成为VIP后,您将拥有八大权益,权益包括:VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
  7. 7、VIP文档为合作方或网友上传,每下载1次, 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等,对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
670 中国循环杂志 2015 年 7 月 第 30 卷 第 7 期(总第 205 期)Chinese Circulation Journal,July,2015,Vol. 30 No.7(Serial No.205) 临床研究 小干扰 RNA 沉默脂肪酸合酶基因对人肝细胞株 HepG2 脂代谢的影响 张秀云,冯艳萍,熊东,叶文静,朱粒仁,范阿强,陈建业,宋永砚 摘要 目的:研究基因干扰技术沉默脂肪酸合酶(FAS)基因后对人肝细胞株 HepG2 细胞内外脂质含量及脂代谢相关基因 表达的影响。 方法:合成 3 对针对 FAS mRNA 不同位点序列的小干扰 RNA(siRNA),分别转染至人肝细胞株 HepG2,实时荧光 定量聚合酶链反应(PCR)检测空白对照组(HepG2 细胞不经过任何处理)、阴性对照组(转染没有任何基因干扰作用的阴 性 siRNA)、FAS-siRNA-1 转染组、FAS-siRNA-2 转染组和 FAS-siRNA-3 转染组的 FAS mRNA 的表达。蛋白免疫印迹 (Western blot)法检测蛋白质的表达水平,筛选出沉默效果最佳的一对 siRNA。将最有效 siRNA 转染至 HepG2 细胞,48 h 后测定细胞内外甘油三酯及总胆固醇含量以及脂代谢相关基因的 mRNA 表达水平。 结果:25 nmol/L siRNA 和 3 μl/ 孔(24 孔板 )转染试剂的转染效率最高。FAS-siRNA-3 对 HepG2 的 FAS 基因的 沉默效果最好,FAS-siRNA-3 转染组的 FAS 在 mRNA 水平和蛋白水平分别降低为空白对照组的(52.33±3.07)% 和(51.57±3.14)%。FAS-siRNA-3沉默FAS基因后HepG2的细胞内和细胞外培养液中甘油三酯含量显著低于空白对照组, 细胞外总胆固醇含量显著低于空白对照组。与空白对照组比较,FAS-siRNA-3 转染组 HepG2 的肝脂酶基因 mRNA 表达 水平显著升高(P0.0001),微粒体甘油三酯转运蛋白基因 mRNA 表达水平显著降低(P0.05),差异均有统计学意义。 结论:FAS 基因沉默可显著降低 HepG2 细胞内甘油三酯、细胞外培养液甘油三酯和总胆固醇的含量,需进一步的 体内外实验加以验证。 关键词 小干扰 RNA ; 脂肪酸合酶 ;人肝细胞株 HepG2 Effect of Small Interfering RNA Silencing the Fatty Acid Synthase Gene on Lipid Metabolism in Human Hepatic Cell Line HepG2 ZHANG Xiu-yun, FENG Yan-ping, XIONG Dong, YE Wen-jing, ZHU Li-ren, FAN A-qiang, CHEN Jian-ye, SONG Yong-yan. Department of Biochemistry, School of Preclinical Medicine, North Sichuan Medical College, Nanchong (637000), Sichuan, China Corresponding Author: SONG Yong-yan, Email: songyongyan2014@ Abstract Objective: To investigate the effect of the gene interfering technology on fatty acid synthase (FAS) gene silencing for lipid contents in human hepatic cell line HepG2 and to study the lipid metabolism related gene expression in HepG2 cells. Methods: A total of 3 pairs of small interfering RNA (siRNA) targeting different sequences

您可能关注的文档

文档评论(0)

zhuwo + 关注
实名认证
文档贡献者

该用户很懒,什么也没介绍

1亿VIP精品文档

相关文档