抑制mtorc1信号通路可改善asd模型小鼠btbr的症状张宏杜亚松.docVIP

抑制mTORC1信号通路可改善ASD模型小鼠BTBR的症状 张宏 杜亚松 [摘要]目的：研究孤独症谱系障碍mTORC1信号通路是否与其交流和社交障碍相关。方法：利用RNA干扰的方法降低孤独症谱系障碍mTORC1信号通路的活性，同时观察干预后的BTBR小鼠其社交及自我理毛行为变化。结果：孤独症谱系障碍mTORC1信号通路活性降低后，单位时间内其社交行为（身体接触和跟随同伴）都出现增加，其中身体接触时间具有统计学差异，刻板重复的自我理毛时间也明显减少。结论：抑制孤独症谱系障碍mTORC1信号通路能明显改善其社交障碍和刻板动作，该小鼠的孤独症谱系障碍mTORC1信号通路明显相关。 ［关键词］孤独症谱系障碍；mTORC1； BTBR Improving the behavioral and neuroanatomical phenotypes in mouse models of ASD by inhibiting the mTORC1 signaling pathway ZHANG Hong, DU Yasong. Department of child and adolescent ，Shanghai Mental Health Center，Shanghai, 200030, China [Abstract] Objective: To investigate whether the central mTORC1 signaling pathway of BTBR mice with autism spectrum disorder is related to the communication and social disorder. Methods: We reduced the activity of the central mTORC1 signaling in BTBR mice by RNA interference, and then observed the changes of social and self grooming behavior of BTBR mice after the intervention. Results: The time of social communication increased and the time of self grooming decreased while the central 作者单位：200030，上海交通大学医学院附属精神卫生中心 通讯作者：杜亚松，E-mail:yasongdu@163.com mTORC1 signaling of BTBR mice was inhibited. Conclusion: The social disorder and stereotyped movement of BTBR mice could be improved by inhibiting the central mTORC1 signaling pathway. ［Key words］Autism Spectrum Disorder；mTORC1； BTBR 孤独症谱系障碍语发迟缓动为[1, 2]。目前的研究认为孤独症谱系障碍环遗传结 mTORC1信号作为细胞内重要的能量感受信号，在神经细胞的发育，突触信号的传递以及学习和记忆中有重要作用[3]。有文献报道孤独症谱系障碍mTORC1信号相关，但其确切的病理机制尚不明确[4]。 BTBR近交系小鼠是常用的研究孤独症谱系障碍，发为[5]们观记录mTORC1信号通路的异常活化。我们进一步利用RNA干扰的方法降低了中枢mTORC1信号通路的活性，同时观察到干预后的BTBR小鼠其社交及自我理毛行为得到部分改善。 1 材料1）实验动物: 6只6周龄C57BL/6J（B6）小鼠和18只6周龄BTBR小鼠均购买自南京模式动物中心，每笼3只小鼠，自由进食及饮水。 2）: 通过GenBank数据库查询mTORC1重要组成蛋白raptor的基因序列，按照RNA干扰设计原则利用shRNA设计程序设计3个shRNA干扰靶点序列。后续的慢病毒载体构建及病毒包装均由上海吉玛生物科技有限公司完成。3）: 磷酸化S6和raptor抗体购买自 cell signaling technology公司, Tubulin 抗体购买自Sigma 公司。 2 分组及方法 6只6周龄C57BL/6J（B6）小鼠和6只6周龄BTBR小鼠适应性饲养1周后，进行交流障碍实验和社交行为实验，实验结束后处死小鼠提取大脑额叶皮层组织抽提蛋白进行后续westernblot实验。12只6周龄BTBR小鼠分成干预组组和对照组