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细菌鉴定中常用的生中理生化反应
实验九
细菌鉴定中常用的生理
生化反应试验 ;
一. 实验目的
1. 了解几种细菌鉴定中常用的生化反应及其原理。
2. 掌握细菌生化反应试验的基本方法。
;
二、实验原理
1.淀粉水解试验 某些细菌能产生淀粉酶将淀粉水解为麦芽糖和葡萄糖,再吸收利用。淀粉水解后遇碘不再显蓝色。
2.明胶液化试验 某些细菌能分泌明胶酶分解明胶产生小分子物质,使培养基由凝固状态变成液态。;三、主要器材
1. 菌种:大肠杆菌(E.?coli)、变形杆菌、枯草杆菌
2. 培养基 :淀粉培养基、明胶培养基
3. 试剂?:碘液、甲基红试剂。
4. 器材 : 试管、小套管、培养皿、接种环、酒精灯、恒温培养箱 ; 四、操作步骤
(一)淀粉水解试验
1.?标记?:取淀粉培养基平板1块,在其左右两边分加标记大肠杆菌、枯草杆菌。????
? 2.?接种:以无菌操??分别接种大肠杆菌、枯草杆菌于以上平板的各相应部位。
3. 培养:倒置于37℃培养48 h后观察结果。;淀粉水解试验示意图;(二)明胶液化试验
1.?标记?:取明胶培养基试管3支,分别标记大肠杆菌、枯草杆菌。????
? 2.?接种:以无菌操作分别穿剌接种大肠杆菌、枯草杆菌至以上各相应试管中。
3. 培养:置28℃培养48~120 h后观察结果。; 五、实验结果
1. 淀粉水解试验结果观察 打开皿盖,滴加少量碘液于平板上,铺匀,若菌苔周围出无色透明圈说明淀粉已被水解。透明圈的大小可说明该菌水解淀粉能力的强弱。
2. 明胶液化试验结果观察 观察试管明胶培养基是否液化及液化的形态。;明胶液化试验结果; 六.注意事项
1. 培养基灭菌时要尽量排尽锅内冷空气,灭菌后要等锅内压力降到零再打开排气阀。
2. 接种前必须仔细核对菌名和培养基,以免搞错。
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