棉花hsp70基因植物表达载体的构建及转化烟草的研究-中国农学通报.pdfVIP

中国农学通报 2015,31(31): 194-198 Chinese Agricultural Science Bulletin 棉花HSP70基因植物表达载体的构建及转化烟草的研究 1 1,2 1 1 1 1 刘 娜 ，倪志勇 ，张海燕 ，邱迎风 ，陈全家 ，曲延英 1 （新疆农业大学农学院/新疆农业大学农业生物技术重点实验室，乌鲁木齐830052 ； 2 中国农业科学院棉花研究所/棉花生物学国家重点实验室，河南安阳455000 ） 摘 要：为研究棉花HSP 70 基因在转基因植物中抗旱效果，利用前期克隆的GhHSP70 基因，以 pCAMBIA 1304质粒为植物表达载体，构建了GhHSP70基因的植物表达载体pCAMBIA 1304-HSP 70；采 用冻融法转入根癌农杆菌EHA 105 菌株，通过叶盘法对模式植物烟草进行遗传转化研究。结果表明，在 潮霉素(50 mg/L)选择压力下获得的烟草转化不定芽和完整植株，经过PCR 方法以及GUS基因组织化学 法检测鉴定转基因烟草，其中有5 株为阳性植株。初步证实了GhHSP70基因已导入烟草基因组中。为 进一步研究该基因的功能提供实验基础，同时为后续转化棉花改善其抗旱能力奠定基础。 关键词：棉花；热休克蛋白70 ；植物表达载体；转基因烟草 中图分类号：Q789 文献标志码：A 论文编号：cas ResearchonPlantExpressionVectorConstructionandTransformationto NicotianatabacumofCottonHSP70Gene 1 1,2 1 1 1 1 LiuNa,NiZhiyong ,ZhangHaiyan,QiuYingfeng,ChenQuanjia,QuYanying 1 (CollegeofAgronomy,XinjiangAgriculturalUniversity/ KeyLaboratoryofAgriculturalBiologicalTechnology,XinjiangAgriculturalUniversity,Urumqi830052; 2InstituteofCottonResearch,ChineseAcademyofAgriculturalSciences/ StateKeyLaboratoryofCottonBiology,AnyangHenan455000) Abstract: Inordertostudytheresponseofcotton HSP70 genetodroughtstressintransgenicplants,the pCAMBIA1304-HSP70,plantexpressionvector,wasconstructedbyusingthecloned GhHSP70geneandthe pCAMBIA1304 vector.ThepCAMBIA1304-HSP 70 wastransformedintoEHA105 strainbyfreeze-thaw method.Then,thegenetictransformationoftobaccowasstudiedthroughleafdishtransformationmethod.