棉铃虫n-乙酰-!-d-氨基葡萄糖苷酶的分离纯化及酶学性质-昆虫学报.pdfVIP

棉铃虫n-乙酰-!-d-氨基葡萄糖苷酶的分离纯化及酶学性质-昆虫学报.pdf

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昆虫 学 报 , , (): !#$ %#’(’)’*+$ ,++$ !#$% ’’( )* ) )+* , (’ -../ ’)()01+1 棉铃虫 乙酰 氨基葡萄糖苷酶的 ! ! ! 分离纯化及酶学性质 2 2 2 ! 黄小红 ,陈清西 ,尤民生 ,王 君 ,关 雄 ( 福建农林大学动物科学学院,生物农药与化学生物学教育部重点实验室,福州 ; 2 G(’’’ 厦门大学生命科学学院,教育部细胞生物学与肿瘤细胞工程重点实验室,福建厦门 G12’’( ) 摘要:以棉铃虫 蛹为材料,通过硫酸铵沉淀分级分离、 分子筛柱层析和 离子交换柱 -.)+’/.01 $ $0(+*.0$ .C=95DC8 H0’’ I3!30G 层析纯化,获得聚丙烯酰胺凝胶电泳纯的/0 乙酰0 020氨基葡萄糖苷酶酶制剂。纯酶的比活力为 1J* EJ+ KL4#。以对硝基苯0 ! 乙酰 氨基葡萄糖苷( )为底物,研究酶催化底物水解的反应动力学。结果表明:酶的最适 为 ,最 /0 0 020 =/M0 020H7?/!? =N ( E1G ! ! 适温度为((O 。该酶在=N ) P * 区域较稳定,而在=N Q * 时能迅速失去活力;在(’O 以下处理G’ 46:,酶活力仍保持稳定,高 于 ,酶很快失去活力。酶促反应动力学符合米氏双曲线方程,测得米氏常数 为 ,最大反应速度 为 (’O 3 ’ E 21 44@7L R 4 4 4 , 2 , 2 · · 。酶催化 反应的活化能为 。 2’ EJG 4@7 R 46: =/M0 020H7?/!? 11 E) STL4@7 ! 关键词:棉铃虫; 乙酰 氨基葡萄糖苷酶;分离纯化;动力学;稳定性 /0 0 020 ! 中图分类号: 文献标识码: 文章编号: ( ) U+1( ! ’)()01+1 ’’( ’)0’)

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