表达PEDF的人胎盘间充质干细胞抑制人脐静脉内皮细胞增殖和迁移.pdfVIP

· 226 · JShanxiMedUniv Mar2017．V0l48No3 ． 表达 PEDF的人胎盘间充质干细胞抑制人脐静脉 内皮细胞增殖和迁移 陈巧玲 ，白亦光 ，肖东琴 ，刘 康 ，冯 刚 (川北医学院第二临床医学院，南充市中心医院肿瘤分院，南充 637000；川北医学院第二临床医学院，南充市中心医院骨科；。川北医学院第二临床医学院，南充市中心医院组织工程与干细 胞研究所；通讯作者，E—mail：lssmdl8@gmail．eom) 摘要： 目的 探讨携带色素上皮衍生因子(pigmentepithelium—derivedfactor，PEDF)基因的腺病毒转染胎盘间充质干细胞(PM— SCs)后对人脐静脉内皮细胞增殖和迁移的抑制作用。 方法 取足月产胎儿的胎盘组织，分离、培养PMSCs，用流式细胞术鉴定 其表面标记。用携带PEDF基因的腺病毒(Ad．PEDF)转染PMSCs，并用Westernblot和ELISA检测转染了Ad—PEDF的PMSCs细 胞 (PMSCs—PEDF)培养上清中PEDF的表达。MTF测定PMSCs—PEDF表达的PEDF对HUVECs增殖的影响。Transwell实验检测 PMSCs—PEDF所表达的PEDF蛋白对 HUVECs迁移的抑制作用。 结果 用流式细胞术对分离的PMSCs进行免疫表型分析，结 果显示，CD44、CD73、CD90、CD105表达呈阳性 ，而CD34、CD45表达呈阴性。Westernblot结果显示 ，重组腺病毒成功将 PEDF基 因传送至PMSCs细胞内并产生分泌性的PEDF蛋白。ELISA结果显示PMSCs-PEDF可并分泌高水平的PEDF至培养基中[(65．2± 4．9)ng／m1]。M丌 结果显示，PMSCs—PEDF培养基上清在稀释比例为 1：2时对 HUVECs抑制率为56．3％±8．7％，随着稀释 比例的增加抑制率逐渐降低。而PMSCs及PMSCs—null的培养基上清则对HUVECs抑制作用很弱。Transwell实验结果显示， 与PMSCs组 (208．8±14．7)及PMSCs—null组 (199．0±20．7)相比，PMSCs—PEDF组 (79．4±14．5)可显著抑制 HUVECs迁移 (均 P0．05)。 结论 PMSCs—PEDF可在体外高效表达PEDF蛋白，并抑制 HUVECs细胞的增殖和迁移。 关键词： 色素上皮衍生因子； 胎盘问充质干细胞； 人脐静脉内皮细胞 ； 细胞增殖； 细胞迁移 中图分类号： R329 文献标志码 ：A 文章编号： 1007—6611(2017)03—0226—05 DOI：10．13753／j．issn．1007—6611．2017．03．006 PEDFexpressedbyhumanplacenta mesenchymalstem cellsinhibitshumanumbilicalveinendothelial cellproliferationand migration CHENQiaoling，BAIYiguang，XIAODongqin，UuKang，FENGGang”(SDepartmentofOntology，NanchongCentralHospital，Jsec— ondClinicalCollegeofNorthSichuanMedicalCollege，Nanchong637000，China；OrthopedicDepartment，NanchongCentralHospital， SecondClinicalCollegeofNorthSichuanMedicalCollege；ResearchInstituteofTissueEngineeringandStem Cell，NanchongCentral Hospital，SecondClinicalCollegeofNorthSichuanMedicalCollege；Correspondingauthor，E—mail：Issmd18@gmail．corn) Abstract： 0bjective Toexploretheinhibitiveeffectofhumanplacentamesench)realstemcells(PMSCs)transfect