热休克胃癌细胞负载dc-cik细胞杀伤癌细胞活性的研究-检验医学.pdfVIP

检验医学２０１２年１０月第２７卷第１０期　ＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｏｃｔｏｂｅｒ２０１２，Ｖｏｌ２７．Ｎｏ１０． ·８４９· 文章编号：１６７３８６４０（２０１２）１００８４９０５　　　中图分类号：Ｒ４４６．６３　　　文献标志码：Ａ 热休克胃癌细胞负载 ＤＣＣＩＫ细胞杀伤癌细胞活性的研究 １ ２ ２ ２ １ 张成磊 ，　陈耀平 ，　杨宝珍 ，　吴若芬 ，　王妍柏 （１．宁夏医科大学，宁夏 银川７５０００４；２．宁夏医科大学总医院医学实验中心，宁夏 银川７５０００４） 　　摘要：目的　研究负载相关抗原的树突状细胞（ＤＣ）联合细胞因子诱导的杀伤（ＣＩＫ）细胞对胃癌细胞的杀 伤作用。方法　取健康人外周血并分离出外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ），经不同细胞因子分别诱导出ＤＣ和ＣＩＫ 细胞，热休克方法处理胃癌ＭＫＮ２８细胞株并制备肿瘤抗原用于负载ＤＣ，与ＣＩＫ细胞共培养，以流式细胞术检 测ＤＣ、ＣＩＫ细胞表型，ＭＴＳ法检测 ＣＩＫ细胞对 ＭＫＮ２８细胞的杀伤作用。结果　ＣＩＫ与ＤＣ共培养后，与单纯 ＋ ＋ ＋ ＋ ＣＩＫ细胞相比较，增殖活性明显提高，ＣＤ３ＣＤ８、ＣＤ３ＣＤ５６双阳性细胞数增多并且具有更强的杀瘤活性，效 靶比为２０．０∶１时，负载ＭＫＮ２８抗原的ＤＣＣＩＫ（ＡｇＤＣＣＩＫ）组对ＭＫＮ２８的杀伤活性为（５７．９６±２．２３）％，远 大于未负载ＭＫＮ２８抗原的ＤＣＣＩＫ组［（３８．０２±２．０６）％］和单纯ＣＩＫ组［（２９．７８±１．８４）％］，差异具有统计学 意义（Ｐ＜０．０５）。结论　以热休克凋亡肿瘤细胞抗原负载的ＤＣ能促进ＣＩＫ细胞增殖分化，并提高其对胃癌细 胞的杀伤活性。 关键词：细胞因子诱导的杀伤细胞；树突状细胞；热休克；胃癌 　　ＳｔｕｄｙｏｎｔｈｅｋｉｌｌｉｎｇａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＤＣＣＩＫｃｅｌｌｓｐｕｌｓｅｄｗｉｔｈｇａｓｔｒｉｃｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｓｏｆｈｅａｔｓｈｏｃｋａｇａｉｎｓｔｃａｎｃｅｒ １ ２ ２ ２ １ ｃｅｌｌｓ　ＺＨＡＮＧＣｈｅｎｇｌｅｉ，ＣＨＥＮＹａｏｐｉｎｇ，ＹＡＮＧＢａｏｚｈｅｎ，ＷＵＲｕｏｆｅｎ，ＷＡＮＧＹａｎｂａｉ．　（１．ＮｉｎｇｘｉａＭｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，ＮｉｎｇｘｉａＹｉｎｃｈｕａｎ７５０００４，Ｃｈｉｎａ；２．ＭｅｄｉｃａｌＲｅｓｅａｒｃｈＣｅｎｔｅｒ，ＮｉｎｇｘｉａＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＧｅｎｅｒａｌＨｏｓｐｉｔａｌ， ＮｉｎｇｘｉａＹｉｎｃｈｕａｎ７５０００４，Ｃｈｉｎａ） 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏｓｔｕｄｙｔｈｅｋｉｌｌｉｎｇｅｆｆｅｃｔｏｆｄｅｎｄｒｉｔｉｃｃｅｌｌｓ（ＤＣ）ａｎｄｃｙｔｏｋｉｎｅｉｎｄｕｃｅｄｋｉｌｌｅｒ（ＣＩＫ）ｃｅｌｌｓ ｐｕｌｓｅｄｗｉｔｈｓｐｅｃｉｆｉｃａｎｔｉｇｅｎｓａｇａｉｎｓｔｇａｓｔｒｉｃｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌｂｌｏｏｄｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒｃｅｌｌｓ（ＰＢＭＣ）ｗｅｒｅ ｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｈｅａｌｔｈｙｓｕｂｊｅｃｔｓ．ＤＣａｎｄＣＩＫｃｅｌｌｓｗｅｒｅｉｎｄｕｃｅｄｂｙｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｙｔｏｋｉｎｅｓ．ＧａｓｔｒｉｃｃｅｌｌｌｉｎｅＭＫＮ２８ｌｙｓａｔｅｓ ｏｆｈｅａｔｓｈｏｃｋｗｅｒｅｕｓｅｄａｓａｎｔｉｇｅｎａｎｄｐｕｌｓｅｄＤＣ，ｗｈｉｃｈｃｏｃｕｌｔｕｒｅｄｗｉｔｈＣＩＫｃｅｌｌｓ．ＴｈｅｐｈｅｎｏｔｙｐｅｓｏｆＤＣａｎｄＣＩＫ ｃｅｌｌｍｅｍｂｒａｎｅｓｗｅｒｅｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ，ａｎｄｔｈｅｋｉｌｌｉｎｇａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＣＩＫａｇａｉｎｓｔＭＫＮ２８ｗａｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙ （ＭＴＳ）．Ｒｅｓｕｌｔｓ　ＣｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈＣＩＫ，ｔｈｅｃｏｃｕｌｔｕｒｅｄＤＣＣＩＫｐｒｅｓｅｎｔｅｄａｓｉｇｎｉｆ