草鱼干扰素的体外诱生及其组织细胞的来源3.pdfVIP

动物学报 　47 (6) : 677 ～683 , 2001 A cta Zoologica S inica 　　　　　 　 草鱼干扰素的体外诱生及其组织细胞的来源 邵健忠　项黎新 (浙江大学生命科学学院 , 杭州 310012) 摘 　要 　草鱼九种组织干扰素 ( IFN) 体外诱生试验结果表明 , 从头肾、脾脏、外周血和胸腺组织中均能诱生出 IFN 。进一步对四种组织的细胞组分进行分离和 IFN 诱导 , 证实 IFN 由其中的白细胞所合成。理化性质、中和 试验、DotEL ISA 和 Westernblot 等研究表明 , 体外诱生的白细胞 IFN 与体内诱生的血清 IFN 是同一种物质。在 此基础上 , 又对白细胞组分进行分离和 IFN 诱导 , 并结合免疫荧光标记技术 , 证实 IFN 由白细胞中的淋巴细胞 所合成。进而采用灭活增殖细胞法 , 对 T 、B 淋巴细胞进行了功能性分离和 IFN 诱导 , 初步证实了 T 淋巴细胞 是草鱼产生 IFN 的主要白细胞。 关键词 　草鱼 　干扰素 　体外诱生 　组织来源 　形成细胞 　　干扰素 ( interferon , IFN ) 是一种具有抗病 在开展了草鱼 ( Ctenopharyn godon idell us) IFN 体 毒、抗肿瘤和免疫调节等功能的细胞因子 , 目前在 内诱生及分离纯化等研究的基础上 ( 邵健忠等 , 人类和高等脊椎动物中已有较深入研究 ( Sidney et 1998 ; 1999 ; 2000 ; 2001) , 进一步开展了其体外 al . , 1981 ; 侯云德 , 1990) 。近年来 , 随着鱼类病 诱生和组织细胞来源研究 , 本文报道该研究结果。 害及其防治问题的日益突出 , 鱼类免疫学研究备受 1 　材料和方法 关注。鱼类 IFN 作为一种重要的免疫因子 , 有希 望为鱼类病害防治开辟新的途径 , 因此其研究正日 11 　实验材料来源 益受到重视。60 年代以来 , 国内外学者已陆续在 1～2 龄草鱼 500 余尾 , 鱼体长 15～25 cm , 体 鲦鱼、虹鳟、大马哈鱼、草鱼和鲫鱼等鱼类中发现 重 35～270 g , 购自杭州市水产研究所 ; 草鱼吻端 了 IFN ( Gravell et al . , 1965 ; Beasley et al . , 组织细胞株 ZC7901 引自浙江省淡水水产研究所 , 1966 ; Oie et al . , 1971 ; DeKinkelin et al . , 1973 ; 用含 10 %胎牛血清 ( FCS) 的 TC199 培养液培 Graham et al . , 1990 ; RogelGaillard et al . , 1993 ; 养。草鱼出血病病毒 GCHV 由作者分离, 在 Pinto et al . , 1993) , 并对其部分理化和生物学性 ZC7901 细胞上增殖传代 , 按 ReedMuench 法测定 质进行了研究 ( Tamai et al . , 1993 ; Murakami et 滴度 TCID50 。 al . , 1995 ; Leong et al . , 1998 ; 邵健忠等 , 2001) 。 12 　草鱼 IFN 的体外诱生试验 但与人类和高等脊椎动物相比较 , 鱼类 IFN 的研 12 1 　不同组织产生 IFN 能力的测定 　无菌条件 究仍相对薄弱 , 许多基本问题 , 如组织细胞来源等 下取外周血、头