杏蔗糖转运蛋白基因pasuc4的获得及其生物信息学分析.pdfVIP

生物技术进展 ２０１６年　 第６卷　 第２期　 １０５~１１２ 研究论文 Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　 ＩＳＳＮ２０９５￣２３４１ Ａｒｔｉｃｌｅｓ 杏蔗糖转运蛋白基因ＰａＳＵＣ４ 的获得及其生物信息学分析 １ꎬ２ ２∗ １∗ ２ １ 康　 爽 ꎬ　 贺红霞 ꎬ　 王　 铭 ꎬ　 郭　 嘉 ꎬ　 薛　 晶 １.吉林农业大学园艺学院ꎬ长春 １３０１１８ꎻ ２.吉林省农业科学院农业生物技术研究所ꎬ吉林省农业生物技术重点实验室ꎬ长春 １３００３３ 摘　 要: 果树通过蔗糖转运蛋白转运蔗糖进入果实细胞中ꎬ蔗糖转运蛋白的转运效率直接影响着果实的糖含量和果实 的品质ꎮ 利用ＲＴ￣ＰＣＲ方法ꎬ从吉农红杏中获得蔗糖转运蛋白基因ＰａＳＵＣ４ꎬ测序结果表明序列全长２ ４８０ ｂｐꎬ其中完整 开放阅读框１５００ ｂｐꎬ编码４９９个氨基酸ꎮ 预测编码的蛋白质分子量为５３.５８ｋＤａꎬ等电点为９.３１ꎮ 相似性及系统进化分 析发现ꎬ所得蔗糖转运蛋白与蔷薇科李属植物中同类蛋白序列相似性很高ꎬ推测其功能也具有保守性ꎮ 对其表达分析结 果显示ＰａＳＵＣ４在杏树各部位中的表达具有组织特异性ꎬ其中成熟叶片中表达量最高ꎬ雌蕊中表达量最低ꎮ 为进一步研 究其生物学功能ꎬ构建了适合植物遗传转化的植物表达载体并进行了烟草遗传转化ꎮ 研究结果为普通杏优良品种培育 提供了参考ꎮ 关键词: 杏ꎻ蔗糖转运蛋白基因ꎻ生物信息学 ＤＯＩ:１０.３９６９/ｊ.ｉｓｓｎ.２０９５￣２３４１.２０１６.０２.０５ Ｔｈｅ Ａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ ａｎｄ Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ Ｓｕｃｒｏｓｅ Ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒ Ｐｒｏｔｅｉｎ ＧｅｎｅＰａＳＵＣ４ ｆｒｏｍ Ａｐｒｉｃｏｔ １ꎬ２ ２∗ １∗ ２ １ ＫＡＮＧ Ｓｈｕａｎｇ ꎬＨＥ Ｈｏｎｇ￣ｘｉａ ꎬＷＡＮＧ Ｍｉｎｇ ꎬＧＵＯＪｉａ ꎬＸＵＥ Ｊｉｎｇ １.Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ ＨｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒｅꎬＪｉｌｉｎＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＣｈａｎｇｃｈｕｎ １３０１１８ꎬＣｈｉｎａꎻ ２.Ｊｉｌｉｎ Ｐｒｏｖｉｎｃｉａｌ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ ＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙꎬＩｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ ＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙꎬＪｉｌｉｎ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓꎬ Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ １３００３３ꎬＣｈｉｎａꎻ Ａｂｓｔｒａｃｔ:Ｓｕｃｒｏｓｅ ｉｓ ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｄ ｉｎｔｏ ｆｒｕｉｔ ｃｅｌｌｓ ｂｙ ｓｕｃｒｏｓｅ ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓ ｉｎ ｆｒｕｉｔ ｔｒｅｅｓ. Ｔｈｅ ｔｒａｎｓｐｏｒｔ ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ ｏｆ ｓｕｃｒｏｓｅ ｔｒａｎｓｐｏｒｔｅｒｓ ａｆｆｅｃｔｓ ｔｈｅ ｓｕｇａｒ ｃｏｎｔｅｎｔ ａｎｄ ｑｕａｌｉｔｙ ｏｆ ｆｒｕｉｔｓ. Ｒｅｖｅｒｓｅ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔ ＰＣＲ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｉｎ ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙ. Ｐｒｕｎｕｓ ａｒｍｅｎｉａｃａ ｓｕｃｒｏｓｅ ｔｒａｎｓｐｏｒｔ ｐｒｏｔｅｉｎ ｇｅｎｅＳＵＣ４ (ＰａＳＵＣ４) ｗａｓ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｆｒｏｍ Ｊｉｎｏｎｇ ｒｅｄ ａｐｒｉｃｏｔ. Ｔｈｅ ｆｕｌｌ ｃＤＮＡ ｗａｓ ２ ４８０ ｂｐ ａｃｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏ ｔｈｅ ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ ｒｅｓｕｌｔ. Ｔｈｅ ｃｏｄｏｎｒｅｇｉｏｎｗａｓ １５００ｂｐꎬｅｎｃｏｄｉｎｇ４９９ａｍｉｎｏａｃｉｄｓ.Ｔｈｅｐｒｏｔｅｉｎｍｏｌｅｃｕｌａｒｗｅｉｇｈｔｗａｓ ５３.５８ｋ