根癌农杆菌介导gus基因对白桦转化的研究-植物研究-东北林业大学.pdfVIP

22 　2 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　 2002 　4 Vol.22　No.2　　　　　　　　　　　BULLETIN OF BOTANICAL RESEARCH Apr., 　2002 GUS 于景华　祖元刚　孔　瑾　石福臣　聂明珠　唐中华 (, 　150040) 　　本文报道了根癌农杆菌介导GUS 基因转化白桦叶盘的研究方法, 对转化过程中各种因 进行了全面探讨, 结果表明:白桦叶盘对卡那霉 的敏感实验, 得出最适筛选浓度为50mg/l;对 头孢霉 和羧苄青霉 的抑菌实验, 最适抑菌浓度为500mg /l;100μM AS 的加入可将抗性不定 芽的诱导率提高3倍;3 ～4d 的预培是最适合叶盘转化的时间;10 ～20mi 是最适合叶盘浸染的时 间;3 ～4d 的共培养对于叶盘转化比较合理。在上述最适合的转化条件下, 农杆菌介导的GUS 基 因对白桦叶盘的转化获得了抗性再生植株, 转化率为2.8%。 　白桦;叶盘法;GUS 基因;基因转化;根癌农杆菌 THE STUDY ON AGROBACTERIUM TUMIFACIENS-MEDIATED TRANSFORMATION FOR WHITE BIRCH(BETULA PLATYPHYLLA )FLASK CONTAINING GUS YU Ji g-hua　ZU Yua -ga g 　KONG Ji 　SHI Fu-che 　NIE Mi g-zhu　TANG　Zho g-hua (Key Laboratory of Forest Pla t Ecology, Mi istry of Educatio , P.R.Chi a, Harbi , 150040) Abstract 　Agrobacterium tumifacie s-mediated tra sformatio for leaf disc of Betu la p la typ hy lla co tai i g GUS w as i vestigated a d factors o Agrobacterium tumefacie s-mediated ge e tra sfer is also discussed i detail.The optimal co ce tratio of ka amyci to strai fu gus is 50mg/l a d of carbe icilli a d cefotaxime is 500mg/l.Rege eratio ratio of adve titious buds will improve 3-fold by addi g of 100μM AS to rege eratio medium.The optimal pre-cultivatio period for leaf disc tra sformatio is 3 ～4 days, the ideal time for leaf disc dippi g i Agrobacterium is 10 ～20 mi utes, a d the optimal co-cultivatio is 4 days.Tra sformed pla ts of white birch were obtai ed u der above co ditio s a d the tra sformatio rate is 2.8%. Key words　White birch;Leaf disc;G US ge e;Ge e tra sformatio ;Agrobacterium tumifacie s 　　(B et ula p latyp hy l la Suk.) , 、, , 、 , , , 。 , 。, UDPG-Ppase , 、 。 。 。