动物微生物学实验4动物微生物学实验4.ppt

实验四 细菌的分离培养及培养性 状的观察 一.目的要求 1．学习、掌握需氧菌和厌氧菌分离培养的基本要领和技术。 2．了解细菌的菌落形态及其在各种培养基上的培养性状。 3．了解培养性状对细菌鉴别的重要意义。 4．掌握钓菌、纯培养及移植技术。 二、基本原理 将细菌经过适度的稀释,接种于培养基上,会出现典型的培养特征,所谓培养特征是指微生物在培养基上所表现的群体形态和生长情况。细菌培养特征的常规检验包括平皿培养基上的菌落特征；斜面培养基上的菌苔特征；液体培养时的生长特征。 菌落是指个体微生物在固体培养基上生长繁殖成的肉眼可见的群落。在表面生长的菌落叫表面菌落；在培养基中生长的菌落叫埋藏菌落。在一定培养条件下，不同的微生物形成的菌落其性状是不相同的，它是鉴别各种微生物的依据之一。 三、器具材料 1. 器材：接种环、酒精灯、火柴、无菌培养皿、无菌吸管(1rnL)。 2. 培养基：牛肉膏蛋白胨琼脂培养基及其培养液，试管斜面培养基，三角瓶装100m1无菌生理盐水(内放玻璃珠)。 3. 菌种：大肠杆菌、变形杆菌、枯草杆菌、钾细菌、金黄色葡萄球菌斜面菌种各1支。 四.操作步骤 一)．需氧性细菌分离培养法 1. 平板划线分离法 2. 倾注平皿分离法 3. 芽胞需氧菌分离培养法 4．利用化学药品的分离培养法 5.实验动物分离法 6. 琼脂斜面分离法 7. 琼脂平板涂布分离法 8. 营养肉汤分离法 二)、厌氧性细菌分离培养法 1.生物学方法 –厌氧肉肝汤法 2.化学方法 a.焦性没食子酸法 b.连二亚硫酸钠 c.硫乙醇酸钠法 3.物理学方法 a.厌氧罐法 b.真空干燥器法 c.加热密封法 d.高层琼脂柱法 三)、兼性厌氧菌的分离培养方法(二氧化碳培养法) 四)、细菌的钓菌、纯培养和移植 五)、穿刺培养 六)、细菌培养性状的检查 五 注意事项 注意：细菌的培养特征随培养基成分，培养时间和温度的变化可能发生变化。所以利用培养特征识别细菌时务必考虑这些因素。 六 实验结果 观察如下图