绿孔雀肠道细菌.docVIP

昆 明 学 院 2015届毕业生论文（设计） 论文题目：绿孔雀粪便中放线菌的多样性 姓 名：刘建惠 学 号：201114010116 所属院系：生命科学与技术系 专业年级：11级生科1班 指导教师：曹艳茹 绿孔雀粪便中放线菌的多样性 摘要 动物肠道是一类典型而又独特的环境,过去将粪便放线菌作为资源研究的极少。本研究以多种动物粪便为对象,通过纯培养的研究手段分析粪便放线菌群落组成,从中发掘有开发潜力的菌种资源和新物种资源。 这次试验样品来自于昆明野生动物园，用9种培养基分离放线菌，并对放线菌的数量、形态、组成等进行了研究。 关键词：绿孔雀 放线菌 放线菌的多样性 目录 第一章前言 1.1绿孔雀介绍 1.2肠道放线菌介绍 1.3研究的目的及意义 第二章材料及方法 2.1绿孔雀粪便样品 2.2培养基 2.3实验方法 2.3.1粪便干热处理及稀释 2.3.2分离培养 2.3.3培养 2.3.4纯化 2.3.5测序 第一章 前言 1.1绿孔雀的介绍 绿孔雀(学名Pavo muticus)，也叫爪哇孔雀、龙鸟，是孔雀属两种孔雀之一，另一种是蓝孔雀(Pavo cristatus)。绿孔雀包括三个亚种。绿孔雀的羽毛颜色鲜艳，可以起到保护色的作用，大多数捕食者，例如虎、豹、野狗、猫头鹰、鹰等都没有辨色能力。绿孔雀是鸟类中的“巨人”之一，体长为1—2米，体重一般为6千克，所以在云南泸水俗称为“6公斤”，但体重较大的可达7.7千克。绿孔雀产于东南亚的广大地区，如印度东北部、缅甸、老挝、越南、柬埔寨、印度尼西亚的爪哇岛，在中国主要发现于云南和西藏地区，数量稀少雄鸟头顶耸立一簇冠羽，约11cm。冠羽中部辉蓝色而具翠绿色羽缘；前部为鱼鳞状，呈辉亮的蓝绿色，有时具浅蓝紫色光泽。后颈、上背和胸呈金铜色，羽基暗紫蓝色，并具翠绿色狭缘，常部分显露于外，尤以下颈和胸为著。下背和腰翠绿色，具铜褐色矢状羽干纹和黑褐色端缘；初级飞羽和初级覆羽肉桂色，具暗褐色羽端；次级飞羽暗褐色，外翈蓝绿色；内侧覆羽铜褐色，间杂有棕色虫蠹状斑；其余翅上覆羽暗蓝绿色，并富有光泽。尾上覆羽多达100~150枚，并特形延长为尾屏，覆于尾上，羽支分离，绿褐色，具紫铜色光泽；近羽端处有椭圆形眼状斑，斑的中心有暗紫色肾状或圆形小斑，外围以辉亮的蓝绿色；其外又围有一圈宽阔的黄铜色，再围以暗褐色和浅黄色狭缘，最外层为浅葡萄红色，羽端紫铜色，色彩极为艳丽，外侧眼斑层次不及中央鲜明。最长的尾上覆羽羽支翠绿色，羽端呈同色的菱角形羽片，且无眼状斑；最外侧数枚尾上覆羽亦为翠绿色，内翈羽枝稀疏，外翈羽支较多，且亦分离，至羽端处形成镰刀状羽片，亦不见眼状斑，尾短，隐于尾屏下，呈黑褐色。腹和两胁暗蓝绿色、肛周和尾下覆羽浓褐色，松软如绒状。雌鸟似雄鸟，羽色与雄鸟同等鲜艳，但无尾屏，背和腰暗褐色，具黄铜色或绿色光彩，尾上覆羽短，不及尾长，并具翠绿色光彩。尾黑褐色，微缀褐白色横斑和羽端。颏、喉白色，两侧杂有褐色。虹膜红褐色，嘴峰黑褐色，下嘴较淡，跗蹠角褐色，眼周裸出部浅钴蓝色，颊裸出部鲜钴黄色。雄鸟具一长距。10-4、10-5、10-6倍的稀释度。 2.3.2分离培养 将配置好的培养基水平放置，用无菌涂布棒沾取稀释样品均匀的涂在表面。 2.3.3培养 接种完毕，将培养皿放入28℃恒温箱培养7天，后观察和统计各类微生物的出现情况,鉴定放线菌。 2.3.4纯化 将需要的菌株挑取在培养基分离纯化，得到纯的放线菌 2.3.5测序 将得到的纯种放线菌提取DNA进行测序